ГОСТ 31709—2012
5.4 Растворители для проведения тонкослойной хроматографии
5.4.1 Раствор для однонаправленной тонкослойной хроматографии
Приготовляют 100 см3 раствора для однонаправленной тонкослойной хроматографии путем
добавления 4см3 метанола (см. 5.1.4) и 1см3 воды к 95 см3 диэтилового эфира (см. 5.1.3) и тщательно
перемешивают (объемное отношение 95:4:1).
5.4.2 Раствор для двунаправленной тонкослойной хроматографии
Приготовляют 100 см3растворадлядвунаправленной тонкослойнойхроматографиипутемдобав
ления 10 см3ацетона (см. 5.1.6) и 3 см3 изопропанола (см. 5.1.7) к 87 см3хлороформа (см. 5.1.1) и тща
тельно перемешивают (объемное отношение 87:10:3).
5.5 Стандартный раствор афлатоксина М,
5.5.1 Основной стандартный раствор афлатоксина М,
Приготовляют основной стандартный раствор афлатоксина М, с номинальной концентрацией
афлатоксина М, 10 мкг/см3(см. 5.1.1) путем повторного суспендирования 10 мкг лиофилизированной
пленки афлатоксина М, в 1 см3хлороформа.
Согласно протоколу АОАС (1] концентрацию основного стандартного раствора афлатоксина М,
определяютпутемизмеренияегооптическойплотностипридлиневолнымаксимальногопоглощения
в диапазоне длин волн 200—400 нм относительно хлороформа (см. 5.1.1). применяемого в качестве
образца сравнения.
Контролируют чистоту афлатоксина М,, регистрируя спектр в интервале 200—400 нм. Измеряют
оптическуюплотность (А) при длине волны максимума поглощения ( \ агс).близкой к365 нм. Вычисля
ют массовую концентрацию с. мкг/см3, по формуле
с =AM ■100/*:,(
1
)
где А — числовое значение оптической плотности, измеренной при >^акс;
М — числовое значение молярной массы афлатоксина М1аr/моль (М = 328 г/моль).
числовое значение молярного коэффициента поглощения афлатоксина М, в хлороформе,
м2/моль
(
е
=1995 м2/моль).
Основной стандартный раствор афлатоксина М, хранят в хорошо закупоренном пузырьке из
темного стекла, защищенном от света, при температуре ниже 0 °С.
Срок хранения основного стандартного раствора афлатоксина М, — один год.
5.5.2 Рабочий стандартный раствор афлатоксина М,
5.5.2.1 Рабочий раствор А
Используют мерную пипетку или микрошприц (см. 6.2)для помещения 50 мм3рабочего стандарт
ного раствора афлатоксина М, (см. 5.5.1) в пузырек. Растворупариваютдосуха. Повторносуспендиру
ют сухойостатокс 500 мм3смеситолуол/ацетонитрил (см. 5.3), чтобы получитьрабочийстандартный
раствор афлатоксина М, с концентрацией 1 мкг/см3 (рабочий раствор А). Раствор А используют для
нанесенияего на пластинки длятонкослойнойхроматографиипри исследованиипробс высоким уров
нем загрязнения или когда массовая концентрация афлатоксина М, близка к 0.50 мкг/дм3.
5.5.2.2 Рабочий раствор В
Помещают 100 мм3раствора А в пузырек. Добавляют900 мм3 смеси толуол/ацетонитрил (см. 5.3),
чтобы получить рабочий стандартный раствор афлатоксина М, с концентрацией 0,1 мкг/см3(рабочий
раствор В). Раствор В используют для нанесения его на пластинки тонкослойной хроматографии при
исследовании проб с низким уровнем загрязнения или когда массовая концентрацияафлатоксина М,
близка к 0,10 мкг/дм3.
6
Средства измерений и оборудование
Используют обычное лабораторное оборудование и. в частности:
6.1 Мерные пипетки требуемой вместимости по ГОСТ 29227.
6.2 Микрошприцы.
6.3 Лабораторную стеклянную посуду: стеклянные колбы и воронки соответствующей вмести
мости по ГОСТ 25336.
6.4 Колбу мерную с одной меткой вместимостью 200 см3по ГОСТ 1770.
6.5 Цилиндр мерный вместимостью 100 см3по ГОСТ 1770.
6.6 Одноразовые шприцы вместимостью 10 и 100 см3.
з