ГОСТ Р 53993—2010/ISO/TS 10272-2:2006
логии, подвижности, микроаэробного роста при температуре 25 °С, аэробного роста при температуре
41,5 °С и наличия оксидазы используют чистые культуры.
9.4 Подтверждение вида Campylobacter
9.4.1 Исследование морфологии и подвижности
9.4.1.1 Суспендируют одну колонию из чашки с колумбийским кровяным агаром (9.3.2) в 1 см3
жидкой среды для бруцелл (5.5) и анализируют морфологию и подвижность с использованием микро
скопа (6.13).
9.4.1.2 Для последующих исследований сохраняют все культуры (9.3.2), в которых обнаружены
изогнутые бациллы с подвижностью спирального штопора (9.4.1.1).
9.4.2 Исследование аэробного роста при температурах 25
“С
и 41,5
°С
Используя изолированные колонии, указанные в 9.4.1.2, при помощи петли (6.11) инокулируют по
верхность обеих чашек с колумбийским кровяным агаром (5.4).
Инкубируют одну чашку при температуре 25 °С в аэробной атмосфере (6.14) в течение 40—48 ч.
Инкубируют вторую чашку при температуре 41.5 °С в аэробной атмосфере в течение 40—48 ч.
Исследуют чашки на предмет видимого роста колоний Campylobacter.
9.4.3 Обнаружение оксидазы
Используя платиново-иридиевую петлю или стеклянную палочку (6.11), отбирают порцию четко
изолированной колонии из каждой отдельной чашки (9.4.1.2) и наносят на фильтровальную бумагу,
смоченную реактивом для обнаружения оксидазы (5.6). Появление лилового, сиреневого или темно-
синего цвета в течение 10 с свидетельствует о положительной реакции. Если используется имеющийся в
продаже набор для анализа оксидазы. необходимо следовать инструкциям изготовителя.
Результаты подтверждают, используя положительный и отрицательный контроль. Примерами под
ходящих контрольных штаммов являются Pseudomonas aeruginosa NCTC 10662 (положительный кон
троль) и Escbericbia coli NCTC 9001 (отрицательный контроль).
9.4.4 Интерпретация
Campylobacter spp. дает результаты согласно таблице 1.
Таблица 1— Характеристики Campylobacter spp.
Наименование показателя
Характеристика
Морфология (9.4.1)
Малые искривленные бациллы
Подвижность (9.4.1)
Характерная
Микроаэробный рост при 25 °С (9.4.2)
—
Аэробный рост при 41.5 °С (9.4.2)
—
Оксидаза (9.4.3)
+
10 Обработка результатов
10.1
Подсчет колоний Campylobacter
10.1.1 Если подтверждается по крайней мере 80 % отобранных колоний (9.4.4), в качестве числа
Campylobacter берут число, приведенное в подсчете в соответствии с 9.3.
10.1.2 Во всех остальных случаях рассчитывают число Campylobacter, которое было получено в
соответствии с 9.3 и подтверждено (9.4.4). Результат округляют до целого числа колоний.
10.2
Метод расчета
10.2.1
Общий случай — чашки, содержащие от
15
до
150
колоний презумптивных Campy
lobacter
Рассчитывают число N Campylobacter, присутствующих в испытуемой пробе как средневзвешен
ное значение на основе двух последовательных разбавлений, используя уравнение:
6