ГОСТ Р 53913—2010
Добавляют 1 см3 реактива Ковача (см. 5.6) и оставляют при комнатной температуре в течение
10 мин.
Появление красного цвета указывает на положительную реакцию. Желто-коричневый цвет указы
вает на отрицательную реакцию.
9.5.3 Серологическая идентификация
9.5.3.1 Общее требование
Исследуют только индол-положительные колонии на серологическую реакцию с антисывороткой
против Е. coli 0157.
9.5.3.2 Выделение автоагглютинирующих штаммов
Одну каплю солевого раствора (см. 5.9) капают на чистое предметное стекло.
Используя петлю (см. 6.10). подмешивают к этой капле одну колонию из чашки с питательным ага
ром (см. 9.5.1), чтобы получилась однородная и мутная суспензия.
Осторожно встряхивают стекло в течение 30—60 с. Наблюдают за результатом на темном фоне и,
в случае необходимости, с помощью увеличительных линз.
При обнаружении в суспензии видимых скоплений бактерий считается, что штамм способен авто-
агглютинировать и далее не должен тестироваться, так как реакция со специфической антисывороткой
невозможна.
9.5.3.3 Реакция с антисывороткой против Е. coli 0157
Используя чистую культуру из питательного агара (см. 9.5.1). суспендируют ее в свежей капле со
левого раствора, как описано в 9.5.3.2, и добавляют маленькую каплю антисыворотки против Е. coli
0157 (см. 5.10).
Реакция является положительной, если агглютинация проявляется в течение 1 мин.
9.5.3.4 Положительная идентификация
Считать положительными те штаммы, которые дают положительную реакцию на индол и реагиру
ютлибо с антисывороткой против 0157. либо с антисыворотками против0157 плюсН7, если имеется.
10 Обеспечение качества испытания
10.1 Испытуемые штаммы
Для обеспечения качества штаммы Е. coli 0157. которые не имеют коэффициентов вирулентнос
ти, характерной для патогенности, можно получить из национальных или международных коллекций
культур. Их рекомендуется применять для испытания сред и антисывороток.
10.2 Культуральный метод
Для проверки возможности лаборатории и среды обнаруживать низкое содержание бактерий
Escherichia coli 0157 в пищевых пробах, подлежащих анализу с помощью метода, описанного в настоя
щем стандарте, контрольные пробы инокулята низкой концентрации непатогенных Е. coli 0157 и высо
кой концентрации другого штамма Е. coli должны исследоваться параллельно с пробой для анализа.
11 Выражение результатов
Для интерпретации результатов следует представитьданные о присутствии или отсутствии бакте
рии EscHerichia coli 0157 в пробе для анализа, указав массу в г или объем в см3.
12 Протокол испытания
В протоколе испытания указывают;
- всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы;
- используемый метод отбора проб (если известен);
- используемый метод испытания со ссылкой на настоящий стандарт;
- температуру инкубации;
- все детали исследования, не оговариваемые в настоящем стандарте или рассматриваемые
как необязательные, а также детали иного свойства, могущие оказать влияние на результаты иссле
дований;
- полученные результаты.
8