ГОСТ Р 53992—2010
6.4Приготовление градуировочных растворов
6.4.1 Приготовление градуировочных растворов С0 для АОЗ, АМОЗ, СЕМ, АГД, d4-A03,
ds-AM03. (С13)3-АГД, 1,2-N15,C13-CEM, НФ-АОЗ, НФ-АМОЗ, НФ-СЕМ, НФ-АГД, НФ44-А03,
НФч15-АМОЗ, НФ-(С13)3-АГД, НФ-1,2-М18,С13-СЕМ
Для приготовления градуировочных растворов на лабораторных весах взвешивают 10 мг* каждо
го стандарта и переносят в мерную пробирку вместимостью 10 см3. Добавляют метанол, помещают в
ультразвуковую баню на 1 мин, доводят полученный раствор до метки метанолом.
Массовая концентрация каждого соединения в растворе С0составляет 1 мг/см3.
6.4.2 Приготовление градуировочных растворов С, — С3 для АОЗ, АМОЗ, СЕМ. АГД,
d4-A03, d5-AM03, (С13)3-АГД, 1,2-N15,C13-CEM, НФ-АОЗ, НФ-АМОЗ, НФ-СЕМ, НФ-АГД, НФч14-АОЗ,
НФ
ч
15-АМОЗ, НФ-(С13)3-АГД, H®-1,2-N18,C13-CEM
Для приготовления градуировочного раствора С, переносят 1см3 раствора С0 в мерную пробирку
вместимостью 10 см3,доводят до метки метанолом и тщательно перемешивают. Массовая концентра
ция каждого аналита в растворе С, составляет 100 нг/мм3.
Растворы С2 и С3 готовят аналогичным образом, используя 100 мм3С0для приготовления 10 см3
раствора С2и 1000 мм3С2 — для 10 см3 раствора С3.
Массовая концентрация каждого аналита в растворе С2 составляет 10 нг/мм3. в растворе
С3 — 1 нг/мм3.
6.4.3 Приготовление смеси нитрофенильных производных АОЗ, АМОЗ, СЕМ, АГД
(НФ-смесь)
Для приготовления смеси нитрофенильных производных переносят по 1000 мм3 каждого стан
дартного раствора С0 (см. 6.4.1) в мерную пробирку вместимостью 10 см3и доводят объем до метки
метанолом.
Массовая концентрация каждого аналита в полученном растворе С5составляет 100 нг/см3.
6.4.4 Приготовление смеси АОЗ, АМОЗ, СЕМ, АГД (смеси метаболитов)
Для приготовления смеси в мерную пробирку вместимостью 10 см3добавляют 100 мм3раство
ра С2АОЗ. 100 мм3 раствора С2АМОЗ. 1000 мм3раствора С2 АГД и 300 мм3 раствора С2 АГД (см. 6.4.1)
и доводят до метки метанолом.
1 см3 данной смеси разбавляют метанолом в 10 раз и получают раствор С5.
6.4.5 Приготовление раствора внутреннего стандарта
Для приготовления раствора внутреннего стандарта в мерную пробирку вместимостью 10 см3
переносят по 100 мм3 градуировочных растворов С, d4-A03, ds-AM03. (С13)3-АГД, 1,2-N15.C13-CEM
(см. 6.4.1) и доводятдо метки метанолом.
Полученный раствор разбавляют в 10 раз метанолом и используют в качестве внутреннего стан
дарта.
Массовая концентрация каждого аналита в полученном растворе составляет 0,1 нг/мм3.
6.4.6 Приготовление смеси нитрофенильных производных АОЗ, АМОЗ, АГД и СЕМ
(НФ-смесь 1)
Для приготовления смеси в мерную пробирку вместимостью 10 см3 добавляют по 1000 мм3С0
растворов НФ-АОЗ и НФ-АМОЗ (см. 6.4.1), объем доводят до метки метанолом.
Далее при помощи последовательного разбавления готовят раствор концентрацией 0,1 нг/мм3.
Для этого 100 мм3полученного раствора разбавляют до 10 см3метанолом (С2 НФ-смесь 1). 1000 мм3
раствора С2 НФ-смесь 1вновь разбавляютдо 10 см3метанолом, получая раствор С3НФ-смесь 1. кото
рый разбавляют в 1000 раз. получая раствор С5 НФ-смесь 1.
6.4.7 Приготовление смеси нитрофенильных производных d4-A03, d5-AM03, (С13)3-АГД,
1,2-N15,C13-CEM (НФ-смесь 2)
Для приготовления смеси нитрофенильных производных в мерную пробирку вместимостью
10 см3 добавляют по 1000 мм3 С0 растворов d4-A03, d5-AM03, (С,3)3-АГД, 1.2-N15.C13-CEM (6.4.1),
объем доводят до мотки метанолом. Далее при помощи последовательного разбавления
метанолом готовят раствор концентрацией 0,1 нг/мм3.
6.4.8 Приготовленные растворы хранят в морозильнике при температуре не выше минус 20 ®С в
течение 1,5 лет. Перед применением растворы выдерживают при комнатной температуре в темном
месте не менее 30 мин.
* Массы навесок для стандартных образцов в виде гидрохлоридов СЕМ; 1.2-N,5.C13-CEM и АГД составляют
14,86; 14,86 и 13,17 мг соответственно.
6