ГОСТ Р ИСО 8871-4—2010
Приложение А
(рекомендуемое)
Исследование экстрагируемых бактериальных эндотоксинов
А.1 Общая часть
Настоящее приложение определяет рутинный методдля снятия бактериальных эндотоксинов с поверхности
эластомерных составляющих. Экстрагируемые бактериальные эндотоксины определяют в соответствии с метода
ми. обозначенными в USP. глава 85 «Исследование бактериальных эндотоксинов» или Ph.Eur. (2). глава 2.6.14
«Бактериальные эндотоксины*.
А.2 Принцип
Экстракцию проводят путем встряхивания эластомерных составляющих в воде, свободной от эндотоксинов.
Определение экстрагируемых бактериальных эндотоксинов проводят есоответствии с методами, обозначенными в
USP или Ph.Eur. (2J, используя лизат амебоцитов
limulus.
полученный из мечехвоста
Limulus polyphemus
и приго
товленный и охарактеризованный для использования в качестве LAL-реагента (
Л
А
Л
-тест).
А.З Реагенты и материалы
А.3.1 Апирогенная стеклопосуда/жаростойкие инструменты (например, щипцы).
А.З.2 Вода, свободная от эндотоксинов.
А.3.3 Эндотоксиновые реагенты, какобозначено в USP или Ph.Eur.
А.4 Подготовка апирогенной стеклопосуды и жаростойких инструментов
А.4.1 Очищают стеклопосудув лабораторной посудомоечной машине.Следует убедиться, что остатки мыла
полностью удалены.
А.4.2 Обертывают стеклопосуду в алюминиевую фольгуследующим образом.
- полностью оборачивают пробирки;
- оборачивают только горловую часть емкостейдля проб.
- полностью оборачивают щипцы.
А.4.3 Депирогенизируют обернутые части при подходящих условиях, например, по меньшей мере 30 мин
при температуре 250 “С.
А.4.4 Не следует удалять алюминиевую фольгу после депирогенизации.
А.5 Экстрагирование эластомерных составляющих
Соблюдая условия асептики, переносят несколько эластомерных составляющих, соответствующих повер
хности (100
±
10)см2.в апирогенную емкостьдля проб. Осторожнодобавляют 100мл воды,свободной от эндотокси
нов. накрывают защитной пленкой и встряхивают (орбитальное взбалтывание) в течение 5 мин при комнатной
температуре.
Если невозможнодостичьплощади поверхности (100
±
Ю)см2,добавляют (1
±
0.1) мл воды на каждый допол
нительный квадратный сантиметр.
В случае эластомерных составляющих с труднодоступными углублениями, например, 13-миллиметровые
пробки для пробирокс лиофилизатом, шаровые клапаны, предохранительные наконечники на иглы и т.д., возмож но.
потребуется разрезать образцы перед экстракцией для адекватного извлечения. Если образцы разрезаны,
вычисляют суммарную истинную площадь поверхности составляющих.
А.6 Форма представления результатов
Представляют результаты а единицах ЕЭ/см2 для образов эластомерной составляющей или в единицах
ЕЭ/мл для экстрагируемых эндотоксинов.
3