ГОСТ Р 53594—2009
реактива No 3. Из экстракта корма отбирают 0.02 см3 и добавляют 0.46 см3 реактива No 3. Закрывают
эппемдорф крышкой и тщательно перемешивают.
Полученный раствор хранению не подлежит.
9 Проведение иммуноферментного анализа
9.1 Общие положения
9.1.1 При проведении испытаний следует использовать реагенты и компоненты, входящие в
один и тот же набор (тест-систему). Разбавление или замена реагентов из набора (тест-системы) дру
гой серии не допускается.
9.1.2 Наборы (тест-системы) следует хранить при температуре от 2 °С до 8 еС в пределах срока
хранения.
Категорически не допускается хранение при минусовой температуре и замораживание реагентов
набора (тест-системы).
9.1.3 Окрашивание раствора хромогена является признаком его порчи и делает невозможным
его применение для анализа.
9.2 Подготовка тест-систомы к проведению анализа
9.2.1 Перед использованием тест-систему вынимают из холодильника и выдерживают при тем
пературе (23 ± 5) °С не менее 30 мин. после чего тщательно перемешивают содержимое флаконов.
Реактив N9 2 из тест-системы в соответствии с приложением А необходимо прогреть при температуре 37
°С до полного растворения кристаллов солей и тщательно перемешать.
9.2.2 После использования реагенты тест-системы сразу убирают в холодильник.
9.2.3 На всех стадиях необходимо избегать воздействия прямого солнечного света.
9.2.4 Для каждого реактива и раствора используют отдельные съемные наконечники дозаторов.
Внесение растворов в лунки проводят осторожно, не касаясь наконечниками их дна и стенок.
9.2.5 Каждый исследуемый рабочий раствор экстрактов испытуемых образцов анализируют в
дублях.
П р и м е ч а н и е — Далее приведены расходы реактивов на два стрипа, что достаточно для анализа двух
исследуемых образцов. Для другого числа образцов количество используемых стрипов и смешиваемых объемов
реагентов изменяют в соответствии с количеством исследуемых образцов.
9.3 Приготовление рабочих растворов для проведения анализа
9.3.1 Для приготовления рабочего раствора отмывочного буфера «ОТ» в колбу вносят цилин
дром 28 см3воды, добавляют 1,47 см3 реактива № 2 из тест-системы в соответствии с приложением А.
перемешивают, наносят маркировку «ОТ».
Срок хранения буфера «ОТ» в закрытой емкости при температуре от 2 °С до 8 °С — 1 мес.
9.3.2 Для приготовления рабочего раствора ферментного конъюгата «ФК» в пробирку вносят
механическим дозатором 2,25 см3 реактива № 10 из тест-системы в соответствии с приложением А и
0,25 см3реактива № 9 из тест-системы в соответствии с приложением А. перемешивают, наносят мар
кировку «ФК». Готовят непосредственно перед использованием.
Раствор хранению не подлежит.
9.4 Проведение испытания
p
b
9.4.1 Из планшета извлекают необходимое число стрипов. Неиспользованные стрипы тщатель
но заклеивают пленкой для заклеивания планшетов и хранят в упаковке при температуре от 2 °С до
8 5С в течение всего срока годности тест-системы.
9.4.2 В лунки планшета вносят механическим дозатором 0.1 см3 градуировочных растворов
N 3 — КО. N94 — К1. N9 5 — К2, № 6 — КЗ. N 7 — К4. N9 8 — К5 из тест-системы в соответствии с при
ложением А или 0.1 см3 рабочих растворов испытуемых образцов.
Каждый раствор вносят в двойной повторности (лунки-дубли).
Далее в каждую лунку вносят 0,05 см3 раствора N9 1— АТ. Стрипы заклеивают пленкой или
закрывают крышкой, инкубируют в термостате при температуре 37 °С в течение 1ч, после чего содер
жимое лунок сливают.
9.4.3 В лунки планшета механическим дозатором вносят 0.2 см3 раствора «ОТ», оставляют на
1—2 мин и сливают. Процедуру отмывки повторяют еще три раза. Остатки жидкости интенсивно стря
хивают на чистую фильтровальную бумагу.
12