ГОСТ Р 53594—2009
8.3.3 Масса (объем, шт.) отбираемых образцов должна быть не менее:
■ 200 г мышечной ткани без сухожилий,
- 100—300 г печени:
- 40 см3мочи;
- один глаз;
- 100 г шерсти животных;
- корм в соответствии с ГОСТ 13496.0.
8.3.4 Каждый отобранный образец должен быть упакован в индивидуальную емкость и промар
кирован с указанием:
- наименования и адреса места отбора пробы:
- даты отбора пробы;
- наименования и количества отобранной пробы.
8.3.5 Срок хранения отобранных образцов при температуре от 2 °С до 8 *С — 2 сут. При отсут
ствии возможности исследования образцов в течение двух суток образцы должны быть заморожены
при температуре минус 20 ®Ссо сроком хранения не более двух месяцев.
8.4Подготовка проб для проведения анализа на содержание клонбутерола
8.4.1 При подготовке проб мочу центрифугируют в течение 10 мин при 4000 м ин1. Механическим
дозатором отбирают 1 см3отцентрифугированной мочи во флакон типа фалькон и добавляют 1 см3
раствора трис-буфора молярной концентрацией 0.1 моль/дм3с pH (9.5 i 0,2) и 2.5 см3смеси этилацета-та
и изопропанола. Перемешивают в течение 5 мин и оставляют до расслоения фаз. Верхний слой
отбирают механическим дозатором в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Экстракцию повторя
ют еще два раза, добавляя механическим дозатором по 1.5 см3 смеси этилацетата и изопропанола.
Верхние слои объединяют и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре
50 вС — 55 °С.
Срок хранения сухих экстрактов при температуре минус 20 °С — 1 мес.
8.4.2 При подготовке проб мышечной ткани и печени исследуемые образцы освобождают от
жира и соединительной ткани. Пробу измельчают на мясорубке. К 5 г фарша механическим дозатором
добавляют 5см3 ацетатного буфера молярной концентрацией 0.2 моль/дм3 с pH (5,2 ±0.2) и гомогени
зируют в течение 2 мин.
Во флакон типа фалькон взвешивают 2 г гомогената, добавляют механическим дозатором 1 см3
раствора хлорной кислоты молярной концентрацией 0,1 моль/дм3. перемешивают в течение 1мин на
приборе для встряхивания, после чего центрифугируют в течение 20 мин при 4000 мин’1. Надосадоч-
ную жидкость (супернатант) переносят в чистый флакон. К осадку добавляют 1см3 дистиллированной
воды, перемешивают и снова центрифугируют в том же режиме. Супернатанты объединяют, pH дово
дят до (9,8
1
0,2) гидроокисью натрия молярной концентрацией 1 моль/дм3 (1 н). Добавляют 2,5 см3
смеси этилацетата и изолропанола. перемешивают в течение 1 мин и отстаивают. Верхний слой пере
носят автоматической пипеткой в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Экстракцию повторяют
еще два раза, добавляя механичесхим дозатором по 1,5 см3 смеси этилацетата и изолропанола.
Верхние слои объединяют и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре
50 °С — 55 °С.
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 ’С — 1 мес.
8.4.3 При подготовке проб корма к навеске массой 1 г цилиндром вместимостью 25 см3 добавля
ют 15 см3дистиллированной воды и интенсивно перемешивают в течение 5 мин. Центрифугируют в
течение 10 мин при 4000 мин’1. Супернатант сливают в круглодонную колбу. Косадку повторно добав
ляют 5 см3 дистиллированной воды, перемешивают и еще раз центрифугируют в том же
режиме. Супернатанты объединяют и исследуют в ИФА.
Срок хранения раствора при температуре от 2 °С до 8 °С — 1 сут.
8.4.4 Шерсть, отобранную для исследований, отмывают три раза водопроводной водой с пере
мешиванием. После каждой отмывки воду сливают декантацией, отжимая остатки воды из шерсти
стеклянной палочкой, добавляют водный раствор твина-20 с массовой долей 0,2 %, вымачивают в
течение 10 мин, сливают и отмывают три раза дистиллированной водой. Шерсть сушат в сушильном
шкафу при температуре 80 °С.
Срок хранения подготовленной для исследований высушенной шерсти при температуре от 2 °С
до 8 °С — один год.
0,1 г отмытой и высушенной шерсти взвешивают во флаконе типа фалькон с завинчивающейся
крышкой, механическим дозатором добавляют 2,5 см3 гидроокиси натрия молярной концентрацией 5
моль/дм3 (5 н) и оставляют в сушильном шкафу на 10 мин при температуре 95 °Сдля гидролиза. Гид-
7