ГОСТ Р 53594—2009
слой экстрагируют повторно с тем же объемом трихлорметана и центрифугируют в том же режиме.
Нижние слои объединяют и упариваютдосуха на роторном испарителе при температуре40 аС — 45 °С.
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 °С — одна неделя.
8.5.5 При определении содержания этинилэстрадиола и дексаметаэона во флакон с гидролиза
том печени, полученным в соответствии с 8.5.2, добавляют механическимдозатором 0.001 см3 концен
трированной соляной кислоты, доводя pH до (1.0 ± 0.2). Затем вносят 3,5 см3 трихлорметана,
экстрагируют в течение 20 мин на ультразвуковой бане и центрифугируют в течение 10 мин при
4000 мин’1. Нижний слой переносят в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Верхний слой экстра
гируют повторно с тем же объемом трихлорметана и центрифугируют в том же режиме. Нижние слои
объединяют и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 40 °С — 45 °С.
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 С — одна неделя.
8.5.6 При определении содержания диэтилстильбестрола, 19-нортестостерона. метилтестосте-
рона и тренболона во флакон с гидролизатом печени, полученным в соответствии с 8.5.2, механичес
ким дозатором вносят 3 см3 метанола и экстрагируют в течение 20 мин на ультразвуковой бане.
Центрифугируют в течение 10 мин при 4000 мин1. Надосадочную жидкость (супернатант) аккуратно
переносят механическим дозатором в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Экстракцию повторя
ют с тем же объемом метанола. После центрифугирования супернатанты объединяют. К осадку меха
ническим дозатором добавляют 3 см3 смеси метанола идистиллированной воды, помещают на 20 мин
в ультразвуковую баню, центрифугируют в течение 10 мин при 4000 мин 1. Супернатанты объединяют,
добавляют 2,0 см3 гексана, тщательно встряхивают и дают отстояться. Верхний гексановый
слой отбрасывают. Обезжиривание супернатанта повторяютеще раз. Водно-метанольный слой после
обез жиривания упаривают на роторном испарителе в течение 10 мин при температуре 50 °С — 55
°С для удаления метанола. В колбу с водным слоем вносят 5 см3 ТБМЭ, экстрагируют в течение 20
мин. пере мешивая каждые 5 мин. Отстаивают до разделения фаз, верхний слой аккуратно
переносят механи ческим дозатором в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Экстракцию
ТБМЭ повторяют. Объединенные эфирные слои упаривают досуха на роторном испарителе
при температуре 50 вС — 55 °С.
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 гС — 1 мес.
8.6 Подготовка проб для проведения анализа содержания анаболиков* в мышечной
ткани
8.6.1 При определении содержания диэтилстильбестрола, 19-нортестостерона, метилтестосте-
рона и тренболона в мышечной ткани исследуемые образцы освобождают от жира и соединительной
ткани. Пробу измельчают на мясорубке. Взвешивают 5 г фарша в сосуд для диспергирования, вносят
механическим дозатором 5 см3 фосфатного буфера молярной концентрацией 0.067 моль/дм3 с pH
(7,2 ± 0,2) и гомогенизируют в течение 2 мин. В чистый флакон типа фалькон вносят 1 г гомогената и
3 см3метанола, экстрагируют в течение 20 мин на ультразвуковой бане и центрифугируют в течение
10 мин при 4000 мин’1. Надосадочную жидкость (супернатант) аккуратно переносят механическим
дозатором в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Экстракцию повторяют с тем же объемом
мета нола. После центрифугирования супернатанты объединяют. Косадкудобавляют 3 см3 смеси
метанола и дистиллированной воды, помещают на 20 мин в ультразвуковую баню, центрифугируют
в течение 10 мин при 4000 мин 1. Супернатанты объединяют, добавляют2.0 см3гексана, тщательно
встряхивают и дают отстояться. Верхний гексановый слой отбрасывают. Обезжиривание
супернатанта повторяют еще раз. Водно-метанольный слой после обезжиривания упариваютв
течение 10 мин при температуре 50 еС — 55 СС на роторном испарителе для удаления метанола. В
колбу с водным слоем вносят 5 см3 ТБМЭ, экстрагируют в течение 20 мин. перемешивая каждые 5
мин. Отстаивают до разделения фаз. Верхний слой аккуратно переносят механическим дозатором
в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Экстракцию ТБМЭ повторяют. Объединенные эфирные
слои упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 50 °С — 55 °С.
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 С — 1 мес.
8.6.2 При определении содержания этинилэстрадиола и дексаметаэона в мышечной ткани
исследуемые образцы освобождают от жира и соединительной ткани. Пробу измельчают на мясоруб
ке. Взвешивают 5 г фарша в сосуд для диспергирования, механическим дозатором вносят 5 см3
натрий-ацетатного буфера молярной концентрацией 0.1 моль/дм3с pH (5,0 ± 0,2) и гомогенизируют в
течение 2 мин.
* За исключением кленбутерола, для проведения анализа которого подготовку проб осуществляют в соответ
ствии с 8.4.
9