ГОСТ Р 53594—2009
8.6.2.1 При определении содержания этинилэстрадиола во флакон типа фалькон вносят 1 г
гомогената, механическим дозатором добавляют 3.5 см3 трихлорметана и экстрагируют в течение 20
мин на ультразвуковой бане. Центрифугируют в течение 10 мин при 4000 мин 1. Супернатант пере носят
механическим дозатором в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Экстракцию трихлормета-ном
повторяют. Супернатанты объединяют и упаривают на роторном испарителе досуха при
температуре 40 X — 45 X . Сухой остаток растворяют в 3 см3 водного метанола с массовой долей 75
%. добавляют к нему 1см3 гексана, встряхивают в течение 1мин на приборедля встряхивания, дают
отстояться до разделения слоев и удаляют верхний слой. Процедуру обезжиривания гексаном повто
ряют еще раз. после чего нижний слой упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 50
°С — 55 °С.
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 °С — одна неделя.
8.6.2.2 При определении содержания дексаметазона во флакон типа фалькон вносят 2 г гомоге
ната. мерным цилиндром добавляют 10 см3смеси ацетонитрила и дистиллированной воды, переме
шивают на приборе для встряхивания в течение 1 мин и экстрагируют в течение 20 мин на
ультразвуковой бане. Центрифугируют в течение 20 мин при 3000 мин 1при температуре 4 X . 2.5 см3
супернатанта переносят механическим дозатором в чистый флакон типа фалькон. Добавляют 4 см3
гексана и 1 см3хлористого метилена, перомешивают на приборе для встряхивания в течение 1 мин.
Центрифугируют в течение 5 мин при 1000 м ин1. В круглодонную колбу вместимостью 50 см3отбира ют
механическим дозатором 1см3 средней фазы, чтосоответствует 0.2 г мышечной ткани, иупаривают
досуха на роторном испарителе при температуре 50 °С — 55 X .
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 X — одна неделя.
8.7 Подготовка проб для проведения анализа содержания диэтилстильбестрола
и дексаметазона в корме
8.7.1 При определении содержания диэтилстильбестрола корм измельчают на электрической
мельнице. Во флаконе типа фалькон с завинчивающейся крышкой взвешивают 1 г измельченного
образца, мерным цилиндром вносят 10 см3смеси метанола идистиллированной воды, перемешивают в
течение 5 мин на приборе для встряхивания и центрифугируют в течение 10 мин при 4000 мин’1.
Супернатант (надосадочную жидкость) аккуратно переносят механическим дозатором в круглодонную
колбу вместимостью 50 см3.Экстракцию повторяют, добавляя к осадку 5 см3смеси метанола идистил
лированной воды. Супернатанты объединяют. Метанол упаривают досуха на роторном испарителе
при температуре 50 X — 55 X .
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 X — 1 мес.
8.7.2 При определении содержания дексаметазона корм измельчают на электрической мельни
це. Во флакон типа фалькон вносят 2 г измельченного образца и 10 см3смеси ацетонитрила и воды.
Перемешивают на приборе для встряхивания в течение 1 мин и экстрагируют в течение 20 мин на
ультразвуковой бане. Центрифугируют в течение 20 мин при 3000 мин’1при температуре 4 X . 2.5 см3
супернатанта переносят механическим дозатором во флакон типа фалькон. Добавляют 4 см3гексана и
1.0 см3 хлористого метилена, перемешивают на приборедля встряхивания в течение 1мин. Центрифу
гируют в течение 5 мин при 1000 мин’1. Механическим дозатором переносят 1 см3средней фазы, что
соответствует0.2 г корма, в круглодонную колбу вместимостью 50 см3иупариваютдосуха на роторном
испарителе при температуре 50 X — 55 X .
Срок хранения сухого остатка при температуре минус 20 X — одна неделя.
8.8 Приготовление рабочих растворов экстрактов испытуемых образцов для
проведения ИФА
8.8.1 При определении содержания кленбуторола в моче, мышечной ткани, печени сухие экс
тракты. полученные в соответствии с 8.4.1 и 8.4.2, растворяют в 1см3дистиллированной воды. Сухой
экстракт, полученный из глазного яблока в соответствии с 8.4.5, растворяют в 2 см3дистиллированной
воды. Тщательно перемешивают, обмывая дно истенки колбы, переносят раствор механическим доза
тором в пробирку типа эппендорф (далее — эппендорф) и центрифугируют в течение 10 мин при
7000 мин0.05 см3супернатанта вносят механическим дозатором в чистый эппендорф. добавляют
0.45 см3 реактива N9 3 из тест-системы в соответствии с приложением А. закрывают крышку и
перемешивают.
Полученный раствор хранению не подлежит.
8.8.2 При определении содержания кленбутерола в корме 0,05 см3 супернатанта, полученного в
соответствии с 8.4.3, вносят механическим дозатором в чистый эппендорф. добавляют 0.45 см3реак
тива Ne 3 из тест-системы в соответствии с приложением А. закрывают крышку и перемешивают.
Ю