ГОСТ 28573-90 С. 5
Центрифуга лабораторная любою типа, обеспечивающая частоту вращения 5000 мин-’.
Автоклав.
Термометры ветеринарные.
Пипетки градуированные вместимостью 5 и 10 см’ по ГОСТ 29227.
Ступка фарфоровая с пестиком.
Поросята живой массой 25—30 кг. непривитые против КЧС. 6 гол.
Раствор фосфатный буферный pH 7,2—7,4 стерильный; готовят по п. 2.2.1.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 18300.
Пенициллин.
Стрептомицин.
Вирус классической чумы свиней (КЧС), эпизоотический вирулентный с активностью
10*° ЛДзо/см*.
Вирусвакцина культуральная из штамма «К» ЛК-ВНИИВВнМ или ВГНКИ с активностью
1050 ИмДм/см3.
4.2. Подготовка к анализу
4.2.1. Приготовление суспензии органов —по п. 3.2.3.
4.2.2. Подготовка животных
Четырем поросятам вводят культуральную вирусвакцину из штамма »К» ЛК-ВНИИВВнМ или
ВГНКИ в разведении 1:100 внутримышечно. У вакцинированных и невакцинированных поросят
ежедневно измеряют температуру. Через 15—20 сут после вакцинации при отсутствии клинических
признаков болезни поросят используют для постановки биопробы.
4.3. Проведение анализа
Двум вакцинированным и двум невакцинированным поросятам, содержащимся в одном боксе,
вводят внутримышечно (в области внутренней поверхности бедра) по 2 см3 смеси суспензий органов
вынужденно убитых больных и павших свиней. Двум вакцинированным поросятам, содержащимся в
другом боксе, вводят эпизоотический вирулентный вирус КЧС вдозе 10*0ЛДМ|/см3. За животными
ведут наблюдение в течение 15 сут с ежедневным измерением температуры тела. В конце контроль
ного периода животных забивают и сравнивают результаты патолого-анатомических и гистологи
ческих исследований павших и убитых животных с клиническими признаками АЧС. Параллельно
пробы органов исследуют методами прямой иммунофлуоресценции, выделения и идентификации
вируса.
4.4. Оценка результатов
Биопробу считаютположительной, если усвиней, инокулированных суспензией органов боль
ных африканской чумой свиней, установлены признаки болезни или наблюдается гибель.
При обнаружении клинических признаков болезни или гибели только невакцинированных
свиней, проводят исследование на подтверждение классической чумы свиней методом прямой
иммунофлуоресценции с применением ФИТЦ-иммуноглобулинов КЧС.
5. МЕТОД ОБНАРУЖЕНИЯ ВИРУСА АЧС В РЕАКЦИИ АУТОГЕМАДСОРБЦИИ
Сущность метода заключается в выявлении гемадсорбирующнх клеток, сформированных в
организме больного АЧС животного.
5.1. Аппаратура, материалы и реактивы
Термостат.
Микроскоп световой инвертированный или обычный.
Шприцы вместимостью 10—20 см3по МРТУ 46—23.
Иглы инъекционные типа «Рекорд* IAI 16-20-115 или 15150.
Стекла предметные по ГОСТ 9284.
Стекла покровные по ГОСТ 6672.
Пипетки мерные по ГОСТ 29227.
Флаконы пенициллиновые.
Панели пластиковые 96-луночные по ТУ 92-2-428.
Раствор фосфатный буферный pH 7,2—7,4: готовят по п. 2.2.1.
Гепарин.
Пенициллин.
Стрептомицин.