ГОСТ Р 53047—2008
Раствор охлаждают до комнатной температуры, переносят в мерную колбу вместимостью 1дм1и
доводят объемдо метки дистиллированной водой. Приготовленныйреактивдолжениметьярко-желтое
окрашивание (без красного оттенка).
Срок хранения в темной бутыли при комнатной температуре — не более6 мес.
При необходимости (в случае образования осадка) раствор фильтруют через воронку со стеклян
ным фильтром.
4.3.4 Приготовление раствора субстрата ксилана массовой доли 1%
В коническую колбу вместимостью 100 см3вносят 0.5 г ксилана. добавляют от 20до 30см3ацетат
ногобуферногораствора по4.3.1. перемешиваютирастворяютпри нагреваниина водяной банестемпе
ратурой от 60 °Сдо 70 °С. Затем колбу с раствором охлаждают, доливают буферным раствором до 50 г
(по массе)итщательно перемешивают.
При наличии осадка или опалесценции раствор осветляют центрифугированием при 7000 мин-1в
течение 10—15 мин или фильтрованием через фильтр со стекловолокном.
Субстрат готовят вдень проведения анализа.
4.3.5 Приготовление рабочих стандартных растворов ксилозы
4.3.5.1 Приготовление основного стандартного раствора ксилозы молярной (массовой) концент
рации 10 мкмоль/см3(1500 мкг/см3)
В мерную колбу вместимостью 100 см3помещают 150 мг высушенной при температуре 105 °С в
течение 1 ч и охлажденной в эксикаторе ксилозы, взвешенной с точностью до 0.0001 г, растворяют в
небольшом количестве ацетатного буферного раствора по 4.3.1, тщательно перемешивают и доводят
объемдо метки.
4.3.5.2 Приготовление рабочих стандартных растворов ксилозы
Из основногостандартногораствора ксилозы по4.3.5.1 готовятсерию разведений всоответствиис
таблицей 1.
Т а б л и ц а 1
Объем стандартного растоора с молярной
(массовой) концентрацией ксилозы
10 мкмоль/см3(1500 мкг/см3), см3
Объем буферного
раствора. см:
Концентрация ксилозы в разведении.
массовая, мкг/см3молярная, мкмолы’см3
0.59.5750.5
1.09.01501.0
1.58.52251.5
2.08.03002.0
2.57.53752.5
3.07.04503.0
3.57.55253.5
4.06.06004.0
5.05.07505.0
6.04.09006.0
Рабочие стандартные растворы ксилозы готовят вдень построенияградуировочного графика, при
этом берут по три параллельных разведения для приготовления каждой концентрации раствора кси
лозы.
4.3.6 Построение градуировочного графика
В 10 пробирок вместимостью 10 см3 вносят по 1.0 см3рабочих стандартных растворов ксилозы с
молярнойконцентрациейот0.5до6.0 мкмоль/см3всоответствиистаблицей 1.добавляютпо 1.0 см3дис
тиллированной воды. 3.0 см3раствораДНС по4.3.3 и быстро перемешивают.
Одновременноготовятконтрольнуюпробунареактивы, длячего впробиркувносят1 см3ацетатно
гобуферного растворапо4.3.1. добавляют 1 см3дистиллированнойводы и3 см3реактиваДНС по4.3.3.
Все пробирки помещают в кипящую водяную баню и кипятят втечение 5мин сточностью, измеряе
мой посекундомеру. Пробиркиохлаждаютдо комнатнойтемпературы и измеряютоптическиеплотности
4