ГОСТ Р 53047—2008
- механическую мельницу, обеспечивающую размалывание исследуемого образца ферментного
препарата до полного прохода пробы через сито;
- сито с размером отверстий 1.0 мм. сделанное из металлического проволочного тканого мате
риала.
4.2.2 Для определения ферментативной активности ксиланазы используют следующие лабора
торную посуду и материалы:
- колбы мерные 1(2)-50,100.200,500.1000-2 по ГОСТ 1770;
- воронки ВФ — 1(2)-60-ПОР 500 ТХС по ГОСТ25336;
- пробирки П1-14-120ХС или П1-16-150ХС по ГОСТ 25336;
- пипетки по ГОСТ 29227;
- пипетки автоматические вместимостью от0.1 до 1,0 см3с наконечниками;
- колбы и стаканы (бюксы) СВ 19/9 и24/10 по ГОСТ25336;
- стаканы В-1-25.50.100.150,250.600. 800.1000 ТС по ГОСТ25336:
- цилиндры 1(2.3.4)-50 (100) по ГОСТ 1770;
- эксикаторлюбого исполнения по ГОСТ 25336;
- ступку и пестикфарфоровые по ГОСТ 9147.
4.2.3 Дляопределенияферментативнойактивностиксиланазыиспользуютследующие реактивы:
- кислотууксусную ледяную по ГОСТ61;
- натрий уксуснокислый трехводный по ГОСТ 199;
- калий-натрий виннокислый четырвхводный по ГОСТ 5845:
- натрия гидроокисьпо ГОСТ4328:
- водудистиллированную поГОСТ 6709:
- кислоту 3.5-динитросалициловую (ДНС) кристаллическую с содержанием основного вещества
98%;
- D-ксилозус содержанием основного вещества 98 % — 99 %;
- ксилан из овса или березовый ссодержанием остатков ксилозы.
4.2.4 Все реактивы должны относиться к подгруппе чистоты 2(х.ч.) или 3(чщ.а.) по ГОСТ 13867.
4.2.5 Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования с
метрологическимиитехническимихарактеристиками, а такжереактивовпокачествуненижеуказанных.
4.3 Подготовка канализу
4.3.1 Приготовление ацетатногобуферного раствора молярной концентрации 0,1 моль/дм3
с pH4.7 из растворов уксусной кислоты иуксуснокислого натрия
4.3.1.1 Приготовление раствора уксусной кислоты
В мерную колбу вместимостью 1 дм3вносят5.7 см3ледяной уксусной кислоты, разводятприблизи
тельно300,0см3дистиллированнойводы. Доводятдометкидистиллированнойводой иперемешивают.
Срокхранения при комнатнойтемпературе — неболее 1мес.
4.3.1.2 Приготовление раствора уксуснокислого натрия
В мерную колбу вместимостью 1 дм3помещают 13,6 гуксуснокислого натрия ирастворяютприбли
зительнов 300.0 см3дистиллированной воды. Затемдоводятдо метки дистиллированной водой и пере
мешивают.
Срокхранения при комнатнойтемпературе — не более 1мес.
4.3.1.3 Для приготовления ацетатного буферного раствора смешивают равные объемы раство
ров уксусной кислоты по4.3.1.1 и уксуснокислогонатрия по4.3.1.2. При необходимости доводят pH рас
твора до 4,7 одним из исходных растворов.
Срокхранения при комнатнойтемпературе неболее 1мес.
4.3.2 Для приготовления раствора натрия гидроокиси массовой доли 10,7 % растворяют 16.05 г
гидроокиси натрия в 150 см3дистиллированной воды. Полученный раствор охлаждают до комнатной
температуры.
4.3.3 Приготовление реактива динитросалициловой кислоты (ДНС) массовой доли 1%
В стакан вместимостью 1дм3вносят 10.0 г ДНС. добавляют 400,0 см3 дистиллированной воды и
перемешивают на магнитной мешалке в течение (25—30) мин при комнатной температуре. Затем, при
постоянном перемешивании, постепеннодобавляют 150.0см3 раствора гидроокиси натрия по4.3.2.
При этом окраска раствора меняетсяотсветло-желтойдо ярко-желтой.
Стаканс полученным раствором помещаютв водяную баню стемпературой (47 i 1)°С, постепенно
небольшими порциямидобавляют300 г виннокислого калия-натрияиперемешиваютдо полногораство
рения реактива.
з