ГОСТ Р 52996—2008
При использовании прибора Флуорофос тестA/D проводятежедневно перед испытанием.
Отмеряют 2.0 см3 ежедневного контрольного раствора для прибора в маркированную кювету.
Помещают кювету в инкубаторный блок, установленный на 38 СС. на 10 мин.
Получаютдоступ ктестуA/D через меню «SETUP». Нажимаютклавишу «SETUP», затем выбирают
пункт меню «A/D Test», нажимая <ог>. При пустом держателе кюветы нажимают «START». Ждут, когда
цифры, появляющиеся на экранедисплея, стабилизируются.
Показаниедисплея должно быть 302 • 4. Если показание вне этогодиапазона, очищают фильтры
возбуждения ииспускания и повторяют тест A/D.
Вставляют предварительно нагретую кювету в держатель кюветы. Закрывают крышкой. Когда
показание дисплея стабильно, записывают отображаемое значение, которое должно быть 602 • 12.
Если значение вне этогодиапазона, используют маленькую отвертку из поставки и медленно поворачи
ваютвинт потенциометраслевойстороны приборапочасовойстрелкеили против, какнеобходимо, пока
показаниедисплея не будет 602.
ТестA’D можнотакже использоватьдляпроверкипригодности готовогок использованию рабочего
субстрата. Только что приготовленный субстрат в режиме A/D обычно дает показание около 650 FLU ,
которое увеличивается со временем.
Неследуетиспользоватьрабочий субстрат, когда надисплееполученопоказаниевыше 1200FLU.
9.4.1.2 Позитивный, негативный иPhosphaCheck-N™ (контрольфосфатазы)механизмыконтроля
После калибровки канала, используемого для коровьего молока, анализируют три контрольных
раствора (т. е. позитивный, негативный и PhosphaCheck-N™) путем добавления 75 мм3 каждого кон
трольного раствора к2 cut3предварительно нагретого субстрата. Выполняют тест ALP.
Показаниедля негативного контроля должно быть < 10, а для PhosphaCheck-N™ < 40.
9.4.2 Испытуемый образец и механизмы контроля, связанные с прибором
9.4.2.1 Тест негативного контроля
Включаюттестнегативного контроля с каждой партией испытуемыхобразцов. Нагреваютиспытуе
мый образец, как описано в 8.1. Показание прибора должно быть меньше 10 мЕ/л, то есть флуоресцен
тная активность но детектируется. Если значение превышает 10мЕ/л. повторяютдействие 9.4.1.2.
9.4.2.2 Тест позитивного контроля
Включают один или больше механизмов позитивного контроля с каждой партией испытуемых
образцов. Приготовляют образцы аналогичного или почти аналогичного состава, используя образцы
сырого молока, разбавленные молоком без фосфатазы.
9.4.3 Тест на интерферирующие вещества
Если значенияALP получены выше ожидаемых, добавляютв кюветус помощью пипетки 0.075 см3
испытуемого образца и 2.0 см3 калибровочного раствора А, который предварительно нагревали в инку
баторном блоке, установленном на 39 °С. в течение 10 мин. и перемешивают.
Помещаюткювету сэтой смесью в прибор Флуорофос® и испытывают, как в 9.2. Если полученное
значение превышает 20 мЕ/л, значит, присутствует интерферирующее вещество. В этом случав повто
ряют испытание со свежим образцом.
9.4.4 Контрольный тест на теплостойкую щелочную фосфатазу
Добавляютдругой испытуемыйобразец в пробирку. Вставляюттермометрили термисторный зонд
в пробиркуи все помещаютв водяную баню, установленную на 63 °С. Когда испытуемыйобразец нагре
вают до 63 аС. его выдерживают при этой температуре 30 мин. затем быстро охлаждают. Определяют
остаточную активность фосфатазы согласно 9.3. Любая остаточная активность обусловлена присут
ствием теплостойкой микробной щелочной фосфатазы.
10 Вычисление ивыражениерезультатов
10.1 Калибровочный коэффициент
Результаты вычисляют автоматически прибором Флуорофос® посредством алгоритма, встроен
ного в фильтровальный флуориметр. Если результаты будут вычисляться вручную, действуютследую
щим образом.
Записывают значения флуоресценции калибровочных растворов В и калибровочного раствора С
(см. 5.4.3), сравнивают с калибровочным раствором А
(
с
а
г
.
5.4.1
).
установленным на нулевую флуорес
ценцию на фильтровальном флуориметре.
Калибровочный коэффициентК вычисляютпо формуле
О)
4
5