ГОСТ Р 52833—2007
3.4.7 подтверждение ПЦР-продукта: Процесс, который показывает, что ПЦР-продукт получен
из целевой последовательности.
3.4.8 ПЦР-ELISA: МетодобнаруженияПЦР-продуктоввжидкойфазе послеихиммобилизациина
твердой фазе, например, влунках микропланшета.
П р и м е ч а н и е — Присутствие ПЦР-продукта визуализируется с помощью гибридизации и последующего
иммуноферментного обнаружения.
3.4.9 ПЦР с горячим стартом: Активация термостабильной ДНК*полимеразы с помощью этапа
прогрева передосновной программой; позволяет избежать неспецифической амплификации.
3.4.10 гнездовая ПЦР: ПЦР. в которой амплифицируется последовательность из продукта пер
вой ПЦР.
3.4.11 мультиплексная ПЦР: ПЦР, в которой используется несколько пар праймеров.
3.4.12 праймер: Олигонуклеотид с определенной длиной и последовательностью, комплемен
тарный фрагментуаналитически значимой последовательностиДНК.
П р и м е ч а н и е — Праймеры ограничивают целевую последовательность ДНК.
3.4.13 целевая ДНК: Выбраннаядля амплификации последовательностьДНК.
3.4.14 денатурация ДНК: Процесс, в результате которого двухцепочечная ДНК разделяется на
одноцепочечные.
3.4.15 отжиг: Гибридизация праймера с комплементарной последовательностью нуклеиновых
кислот в заданныхусловиях.
3.4.16 элонгация праймера: Ферментативная реакция, приводящая к синтезу новой цепи ДНК
путем добавления одиночныхдезоксирибонуклеотидов к З’-концу праймера.
3.4.17 ДНК-полимораза для ПЦР: Термостабильный фермент, катализирующий циклический
синтезДНК.
3.4.18 мастермикс: Смесь реагентов, необходимых для ПЦР. за исключением целевой ДНК и
контролей.
3.4.19 урацил-Ы-гликозилаза; UNG: Фермент, расщепляющий любую последовательность нук
леиновых кислот, содержащую дезоксиуридин (дУ) по местуэтого нуклеотида.
3.4.20 амплификатор: Автоматический прибор, выполняющий необходимые для ПЦР циклы
нагрева иохлаждения с заданными условиями.
3.4.21 анализ по конечной точке: Качественный анализдля обнаружения ПЦР-продуктов.
3.4.22 анализ в реальном времени: Метод для обнаружения ПЦР-продуктов во время ампли
фикации.
3.5 Термины, относящиеся к контролям
3.5.1 положительный контроль процесса: Проба, зараженная культурой целевого патогенно
го микроорганизма, которая проходит всеэтапы испытаний, что и анализируемые пробы.
3.5.2 отрицательный контроль процесса: Проба пищевогопродукта, заведомо несодержащая
целевойпатогенныймикроорганизм, котораяпроходитвсеэтапы испытаний, чтоианализируемыепро
бы.
П р и м е ч а н и е — Процесс испытаний может включать в себя пробоподготовку. обогащение, выделение
ДНК и амплификацию целевой последовательности.
3.5.3 Контроля амплификации
3.5.3.1 внутренний контроль амплификации: Заданные массаДНК или число ее копий, добав
ляемые в каждую реакцию, ивыполняющие роль внутреннего контроля амплификации.
3.5.3.2 внешний контроль амплификации: Заданные масса контрольной ДНК или число ее
копий, добавляемые в аликвоту выделенных из пробы нуклеиновых кислот, которые служат контролем
амплификации в отдельной реакции.
3.5.4 отрицательный контроль выделения (контроль чистоты выделения): Контроль, про
шедший всеэтапы выделенияДНК, но в отсутствие анализируемой пробы.
3.5.5 положительный контроль ПЦР: Реакционная смесь, содержащая определенные массу
целевойДНК или число ее копий.
3.5.6 отрицательный контроль ПЦР: Реакционная смесь с не содержащей ДНК водой и без
каких-либо ингибиторов ПЦР.
3.6 Термины, относящиеся к ДНК-зондам
3.6.1ДНК-зонд: Меченая молекула нуклеиновой кислоты с определенной последователь
ностью, используемаядля обнаружения целевой ДНК с помощью гибридизации.
з