С 14 ГОСТ 27788—88
3.6.2.3.
Подготовка хроматографической бумаги
Из листа хроматографической бумаги вырезают круги диамет
ром 28—32 см (в зависимости от размера камеры). Из центра кру га
циркулем проводят окружность радиусом 2 см. Круг делят на
шесть разных секторов, в центре круга делают отверстие диамет
ром 0,5 см для фитиля, который скручивают из кусочка фильтро
вальной бумаги.
3.6.2.4.
Подготовка газона для биоавтографии
В стеклянный лоток наливают 100 см3 голодной агаровой сре
ды w 80 см3 питательнойагаровой среды стест-культурой
Вас. subtilis 6633.
3.6.3.
Проведение испытания
3.6.3.1. На два противоположных сектора круга (наотрезок
дуги внутренней окружиостн)микропипеткой наносят раствор
стандартного образца гризина в соляной кислоте концентрации
0,01 моль/дм3 в количестве 0,1 см3. Таким же образом наносят
растворы двух испытуемых проб. Для кормогризнна-40 объем на
носимойпробысоставляет 0,025 см3, для кормогризнна-10—
0.1 см3. При нанесении проб хроматограммы периодически просу
шивают феном. После нанесения проб в отверстие в центре диска
вставляют фитиль и хроматограмму помешают,в камеру так, что бы
фитиль был погружен в растворитель.
Для лучшего разделения компонентов гризинового комплекса
хроматографирование проводят в течение 15— 16 ч. После оконча
ния процесса хроматограмму вынимают из камеры и высушивают в
вытяжном шкафу. Затем хроматограмму разрезают по диаметру на
две части, так чтобы в каждой из них был сектор со стандарт ным
образцом и секторы с двумя исследуемыми образцами.
3.6.3.2. Одну половину хроматограммы проявляют бноавтогра-
фическим способом, для чего из каждого сектора хроматограммы в
радиальном направлении вырезают полоски шириной 0,5 см и
накладывают их на газон с тест-культурой параллельно одна дру
гой на расстоянии 2 см, совмещая их стартовую линию. На обрат
ной стороне лотка отмечают стартовую линию и положение каж
дой полоски. Через 3—5 мин полоски снимают пинцетом.
Лоток с газоном помешают в термостат с температурой 3?’С
на 18-20 ч.
3.6.3.3. Вторуюполовинухроматограммыопрыскивают
0,25%-ным раствором иингидрина в эталоне с 1%-ным раствором
уксусной кислоты и высушивают в вытяжном шкафу. Из нннгид-
риноокрашенных полосок хроматограммы стандартного образца и
соответствующих им полосок хроматограммы испытуемых проб в
радиальном направлении вырезают квадраты размером0,5х