ГОСТ 27786-88 С
9
Суспензия тест-культуры Вас. subtilis 6633 готовят следую
щим образом: тест-культуру Вас. subtilis 6633 переносят микро
биологической петлей в пробирку с физиологическим раствором,
затем пипеткой каплю полученной суспензии переносят в чашки
Петри со средой МПА, растирают ее по чашке стеклянным шпате
лем, после чего этим же шпателем переносят оставшуюся на нем
культуру из чашки в чашку с вышеуказанной средой путем расти
рания (5—7 чашек), добиваясь таким образом в последующем
роста отдельных характерных колоний.
Тест-культуру выращивают при температуре 37°С в течение
18—24 ч. Затем отбирают типичны^ колонии — мелкие, сероватые
с зубчатым краем и пересевают бактериальной петлей на
скошен ный МПА в пробирку и выращивают при температуре
37°С в те чение 18 ч, после чего культуру со скошенного
агара смывают 5— 10 см3 стерильной дистиллированной воды и
смывпереносят
в матрацы. Засеянный матрац выдерживают при температуре 37°С
в течение 5—7 сут, после чего производят микроскопический конт
роль и, если в мазках, окрашенных по Граму, имеется в поле
зре ния 80—90% спор, делают смыв культуры стерильной
дистиллиро ванной водой.
Полученную взвесь спор прогревают при температуре 60—70СС
па водяной бане в течение 30 мин, затем взвесь спор* промывают
не менее трех раз стерильной дистиллированной водой при
центри фугировании до полной прозрачностинадосадочной
жидкости. Промытую взвесь спор хранят в стерильной
дистиллированной воде в запаянных ампулах или пробирках в
течение двух лет при температуре от 4 до
10°С.
Гризина основной стандартный раствор концентрации 1000 ЕД
в 1 см3; раствор готовят следующим образом; 20 мг стандартного
образна гризина, взвешенные с погрешностью не более 0,0002 г,
растворяют в рассчитанном объеме раствора соляной кислоты
кон центрации 0,01 моль/дм*.
Объем раствора соляной кислоты (Xj) в кубических сантимет
рах вычисляют по формуле
где
т6
— масса стандартного образца сульфата гризина, мг;
А
— активность стандартного образца сульфата гризина,
ЕД в 1 мг (весовое выражение 1 ЕД* активности суль
фата гризина зависит от активности действующего в
настоящее время стандартного образца);
1000— активность основного стандартного раствора сульфата
гриэнна, ЕД в 1 см3.