ГОСТ 27788-68 С 11
на зоны задержки диаметром от 17 до 21 мм. В случае получения
зон задержки диаметром менее 17 мм или более 21 мм готовят
новую партию среды, подбирая новые серин компонентов, или
увеличивают (уменьшают) количество тест-микроба, вносимого
в питательную среду, с целью достижения оптимального размера
диаметра зон задержки роста тест-микроба.
3.5.2.3.
Построение градуировочного графика для определения
активности гриэина
Для построения градуировочного графика из раствора, содер
жащего 10 ЕД в I см3, готовят 5 растворов концентрациями 1,8;
2,4; 3,0; 3,8; 4,5 ЕД с 1 см3. Раствор, содержащий 3 ЕД в I см3,
яв ляется контрольным.
Полученные стандартные растворы, за исключением контроль
ного, капельницей вносят в 3 лунки (по 3 чашки на каждую кон
центрацию). Контрольный раствор вносят в остальные 3 лунки
всех 15 чашек. Объем вносимых растворов (стандартного и конт
рольного) должен быть равным и составлять около 0,1 см3. Перед
работой капельницу тщательно ополаскивают буферным раство
ром, а затем раствором, который следует вносить в каждую лунку.
Чашки выдерживают в течение 16— 18 ч в термостате при темпе
ратуре 375С, затем измеряют диаметры зон задержки роста тест-
культуры.
Для каждой концентрации рассчитывают среднее арифметиче
ское диаметров зон задержки роста по 3 чашкам. Для контроль ной
концентрации подсчитывают среднее арифметическое диамет ров зон
задержки роста отдельно по 3 чашкам и по всем 15 чаш кам, находят
поправку, которая представляет собой разность меж ду средними
арифметическими контрольных зон задержки роста, вычисленных
по 15 и по 3 чашкам.
Полученные поправки прибавляют к средним значениям диа
метра зон задержки роста стандартных растворов концентрации
1,8; 2,4; 3.0; 3.8; 4.5 ЕД в 1 см3, вычисленных по 3 чашкам.
По полученным данным на полулогарифмической сетке строят
градуировочный график. На ось абсцисс наносят средние значения
диаметра зон задержки роста стандартных растворов, полученных
после внесения поправки, а также среднее значение диаметра зо ны
контрольного раствора, вычисленное по всем 15 чашкам. На оси
ординат наносят соответствующие концентрации растворов.
Градуировочным графиком пользуются в течение двух меся
цев, периодически проверяя угол наклона кривой по двумкон
центрациям на 3—5 чашках.
3.5.3.
Проведение испытания
На каждую пробу испытуемого препарата используют нс ме
нее 3 чашек.
Капельницей в три лунки каждой из чашек вносят рабочий
стандартный раствор, а в три другие лунки — один из растворов