С. 8 ГОСТ 20264.2—88
ТЭ — тнрознновый эквивалент, определяемый по градуиро
вочной характеристике, см3/мкмоль;
10 — время гидролиза субстрата, мин;
т — масса ферментного препарата, взятая на протеолиз, мг;
1000 — переводной коэффициент полученных единиц на 1 г
ферментного препарата.
За окончательный результат испытания принимают среднее
арифметическое значение активностей, полученных при анализе
двух параллельных навесок препарата.
Относительное допускаемое расхождение между значениями
активностей двух параллельных навесок не должно превышать
5%. Результат округляют до первого десятичного знака.
Предел возможных значений относительной погрешности из
мерений протеолитической активности при доверительной вероят
ности Р = 0,95 составляет 5%.
3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
МЕТОДОМ ФОЛП (для определения щелочных протеина! при pH 10,5)
3
1
За единицу протеолитической активности принята способность
фермента катализировать гидролиз 1 г белка (казеина) п строго
определенных условиях: температуре 40°С, pH 10,5 и времени
гидролиза 1 ч.
. ,
Аппаратура,м а т е р и а л ы ,реактивы,р а с т
воры
Применяемая аппаратура и материалы по и. 2.2.
Казеин по Гаммерстену.
Натрий углекислый по ГОСТ 83—79, раствор концентрацией
0,2 моль/дм3 и 0,5 моль/дм3.
Натрий двууглекислый но ГОСТ 2156—76, раствор концен
трацией 0.2 моль/дм3.
Трихлоруксуснаякислота(ТХУ),раствор концентрацией
0.3 моль/дм3.
Натрия гидроокись, раствор концентрацией 1 моль/дм5.
Реактив Фолнна по п. 2.3.4.
3.2. Подготовка к и с п ы т а н и ю
3.2.1. Приготовление раствора ферментного препарата
0,100—1,000 г исследуемого препарата (в зависимости от пред
полагаемой активности) тщательно растирают с небольшим ко
личеством дистиллированной воды, количественно переносят в
мерную колбу вместимостью 100 см5, доводят дистиллированной
водой до метки и перемешивают. Из этого раствора готовят нс
менее двух разведений в зависимости от предполагаемой актив
ности.
Каждое разведение испытуемого раствора анализируют в двух
повторностях.