ч./
ГОСТ 20264,2—88 С б
Каждое разведение испытуемого раствора анализируют в двух
повторностях. Для испытания берут две параллельные навески
препарата.
Раствор ферментного препарата готовят непосредственно перед
определением.
2.3.6. Приготовление раствора с массовой долей казеината
натрия 2% (субстрат).
2.3.6.1. Д л я к и с л ы х протеиназ (pH 2.5)
2.000 г воздушно-сухого казеината натрия растворяют в 00 см3
буферного раствора Уб3 с pH 5.5. Затем раствор доводят до pH
2,5 добавлением 3,0- -3,5 см3 раствора соляной кислоты концентра
цией 1 моль/дм*.
Добавление соляной кислоты (до pH 3.0) следует проводить
быстро при интенсивном перемешивании раствора. При дальней
шем подкислении раствора до pH 2.5 кислота вносится по каплям.
Затем раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3
и доводят объем до метки буферным раствором Уб| с pH 2.5.
Пр и ме ча ни е . При подкислении расгнора казеинат иатрни соляной кис
лотой первоначально (при значении pH в диапазоне 3,1—3.0) наблюдается об
разование мелких хлопьев, которые исчезают при дальнейшем добавлении со
ляной кислоты до pH 2,5.
2.3.62. Д ля к и с л ы х (pH 5.5). нейтральных (pH 7.2)
и щ е л о ч н ы х (pH 9,5) п р о т е и н а з
2.000 г воздушно-сухого казеината натрия растворяют в 90 см*
Уб| соответствующего pH, после чего раствор доводят до pH 5.5
(для кислых протеиназ) добавлением нескольких капель раствора
соляной кислоты концентрациейI моль/дм3, а до pH 7.2 (ней
тральных) и 9.5 |щелочных) добавлением нескольких капель рас
твора гидроокиси натрия концентрацией I мать/дм3.
Затем раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3
и доводят объем до метки буферным раствором Уб» соответствую
щего pH.
Пр им еч ан и я:
1. Для сокращения премсяи растворения казеината натрия раствор готовит
при нагревании до температуры 70*0 на мапптюй мешалке.
2. Срок хранения раствора в холодильнике в плотно закрытой склянке не
более 3 еут.
2.3.7. Проведение испытания
Берут три пробирки (одна контрольная, две опытные).
В опытные пробирки наливают по 2 см3 субстрата и помешают
их в ультратермостат при температуре 30°С.
Примерно через 10 мин в каждую пробирку приливают по
2 см1 раствора фермента (предварительно термостатированного
при 30°С 3—4 мин), пробирки встряхивают « оставляют на гидро-