Электронная версия
ГОСТ Р 50928-96
Склянки с притертой пробкой.
Стеклянные палочки.
Марля медицинская по ГОСТ 9412.
Колонки стеклянные диаметром 2—4 см и высотой 80 см.
Калия гидроокись по ГОСТ 24363.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962 или ГОСТ 18300.
Спирт этиловый абсолютированный для спектрофотометрии или по нормативному доку
менту |6|.
Гексан по нормативному документу |7|.
Спирт изопропиловый (пропанал-2) по нормативному документу |2|.
Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166.
Ретинол ацетат (витамин А) по нормативному документу 111|.
Эргокальциферол кристаллический (витамин D) по нормативному документу |!3|.
а-токоферолацетат (витамин Е) по нормативному документу |12|.
Алюминия окись для хроматографии, нейтральная по нормативному документу |8|.
Гидрохинон по ГОСТ 19627.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Бумага универсальная индикаторная по нормативному документу |9|.
Фильтры обеззоленные (красная лента) по нормативному документу |Ю|.
Допускается использование другой аппаратуры, реактивов и материалов с техническими и
метрологическими характеристиками не ниже указанных.
4.2Порядок подготовки к проведен ию контроля
4.2.1 Определение массовой концентрации масляного раствора витамина А по 3.2.5.
4.2.2 Приготовление стандартного раствора витамина А
Для приготовления стандартного раствора взвешивают (лучше на часовом стекле)
навеску масляного препарата, необходимую для приготовления раствора с активностью
витамина 10000 МЕ/см3, переносят ее в мерную колбу вместимостью 25 см3 и растворяют
в изопропиловом спирте. Раствор перемешивают и доводят до метки спиртом. Хранят в
холодильнике в емкости с притертой пробкой и используют в течение недели.
4.2.3 Приготовление стандартного раствора витамина D,
Ампулу кристаллического эproкальциферола, содержащую 0.1000 г. помешают в мерную колбу
вместимостью 100 см3, доводят содержимое колбы до метки изопропиловым спиртом и перемеши
вают. Полученный раствор (1) содержит 40000 МЕ/см’ витамина 0:. Из него берут 1 см’ раствора,
помещают в мерную колбу вместимостью 50 см’, доводят до метки’этим же спиртом и перемеши
вают. Полученный раствор (2) содержит 800 МЕ/см3 витамина D:. Раствор хранят в плотно
закрытой стеклянной посуде в холодильнике.
4.2.4 Приготовление стандартного раствора витамина Е
Навеску масляного препарата а-токоферолацетата массой 0.0500 г переносят в мерную колбу
вместимостью 25 см3, растворяют в изопропиловом спирте, доводят им до метки и тщательно
перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в емкости с притертой пробкой в течение одной
недели.
4.2.5 Подготовка растворителей
Очистку растворителей, применяемых в хроматографии, проводят посредством перегонки,
отбрасывая первую и последнюю фракции в количестве ’/10 от первоначального объема, или
пропусканием через колонку, заполненную активированной окисыо алюминия.
Окись алюминия активируют при нагревании в течении 1 ч при температуре 400—450*С.
Колонку высотой 60—80 см и диаметром 2 см заполняют 80 г активированной окиси алюминия и
пропускают через нее 700 см3 растворителя. Для проверки чистоты в колонку жидкостного
хроматографа загружают 50 мкдм3 растворителя. В случае его загрязнения на хроматограмме
появляются пики, соответствующие времени удерживания витаминов A. D, Е.
4.2.6 Приготовление водно-спиртового раствора гидроокиси калия с массовой (Ьлей Ю%
Растворяют 20 г гидроокиси калия в смеси из 20 см’ воды и 180 см3 этилового спирта.
Раствор готовят непосредственно перед контролем.
4.3 П о р ядок п р ов е ден и я контроля
4.3.1 Омыление и подготовка к контролю стандартных растворов витаминов A, D, Е
В конические колбы вместимостью 250 см3, снабженные обратным холодильником, помеша
ют 1 см3 раствора |2| витамина D по 4.2.3, 0,25 см3ретинол ацетата и 0,2 см3а-токоферолацетата.
1557