ГОСТ I» 50928-96
Электронная версия
3.1. А п п а р а т у р а , материал ы и реактивы
Хроматограф жидкостный микрокодоночный «Милихром» по нормативному докуме
1
гту |1|
или его последующие модификации со спектрофотометрическим детектором и спектральным
диапазоном 190—360 нм.
Спектрофотометр со спектральным диапазоном работы 186—1100 нм.
Колонка хроматографическая одного из указанных размеров: 2x64, 2x80. 2x120 мм с числом
теоретических тарелок не менее 4 тыс., заполненная одним из следующих сорбентов: Силасорб С
18, Силасорб РНС 18, Сепарон С 18.
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по
ГОСТ 24104.
Насос водоструйный по ГОСТ 25336.
Баня водяная с терморегулятором.
Колбы конические со шлифом вместимостью 25. 50 см3, КН-2-25-18МХС по ГОСТ 25336.
Пипетки 1-1-(1, 2)-! по ГОСТ 29169.
Пипетки 1-1-1(2)-1(10) по ГОСТ 29227.
Цилиндры 1(2, 3, 4)-100. 1(2, 3, 4)-500 по ГОСТ 1770.
Колбы
мерные 2-25-1(2) (исполнения 2, вместимостью 25
c
m
j, 1-
го или
2-
го
класса точности)
по
ГОСТ
1770.
Колбы мерные 2-50-1(2) по ГОСТ 1770.
Воронка ВФО-40-ПОР 16 ХС по ГОСТ 25336.
Холодильник ХПТ-1-100-18 ХС по ГОСТ 25336.
Ретинол ацетат по нормативному документу’ |11|.
Витамин Е-ацетат по нормативному документу |12|.
Спирт изопропиловый (пропанол-2), х. ч. по нормативному документу’ |2|.
Спирт пропнловый (пропанол-1), х. ч. по нормативному документу |3).
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, х. ч. по нормативному документу
|4|. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Допускается использование другой аппаратуры, реактивов и материалов с техническими и
метрологическими характеристиками не ниже указанных.
3.2Порядок подготовки к проведен ию контроля
3.2.1 Отбор проб - по ГОСТ 13496.0
3.2.2 Чриготов.\ение элюента От хроматографии
Трехкомпонентный элюент готовят смешиванием ацетонитрила, пропилового спирта и
дистиллированной воды в объемном соотношении 42:50:8. Для этого в склянку вместимостью
1000 см5 вносят цилиндром 500 см3 пропилового спирта, 420 см3 ацетонитрила и 80 см3
дистиллированной воды.
Приготовленную смесь растворителей фильтруют через стеклянный фильтр и помешают в
стеклянный сосуд с притертой пробкой. Полученный раствор можно хранить в течение I мес.
3.2.3 Подготовка хроматографической колонки
При использовании новой колонки или колонки после длительного перерыва в работе
из нее следует удалить воздух и тщательно промыть элюентом до получения стабильной
нулевой линии. Дтя этого через колонку пропускают элюент в количестве 20—30 свободных
объемов колонки, т.е. два полных шприца насоса хроматографа при расходе элюента
сначала 50 мкдм3/мин, а затем 100 мкдм’/мин. Промывку колонки заканчивают при
получении стабильной нулевой линии.
После промывки колонки проводят ее насыщение витаминами А, Е. для этого выполняют
7—10 анализов наиболее концентрированных градуировочных растворов витаминов А. Е. Насыще
ние колонки прекращают, когда отношение разности между двумя последовательными определе
ниями концентрации витамина А(Е) к среднему арифметическому значению этих операций не
превышает 3%.
При правильной эксплуатации колонка выдерживает 500—600 анализов.
3.2.4 Приготовление растворителя Оля экстракции витаминов Л, Е из п/>е.иикса
Для экстракции витаминов используют двухкомпонентный экстрагент состава: изопропило
вый спирт и дистиллированную воду в объемном соотношении 97:3. Для этого в мерную колбу
вместимостью 1000 см3 вносят пипеткой 30 см3 дистиллированной волы и доводят до метки
изопропиловым спиртом.
Хранят в стеклянной емкости с притертой пробкой до полного использования экстрагента.
2
150