9
см3 раствора D1 и доводят до метки 1 см3 деионизированной водой.
Массовая концентрация аналита в растворе С3 составляет 10 нг/см3. Массовая концентрация внутреннего стандарта в растворе С3 составляет 40 нг/см3.
Срок хранения растворов при температуре от0 °С до 8 °С — не более 3 мес.
- Приготовление градуировочных растворов С4
Для приготовления градуировочного раствора С4 к сухому остатку после упаривания «чистой» пробы, полученной в соответствии с условиями подготовки проб (раздел 7), переносят 0,001 см3 раствора С1 и 0,1 см3 раствора D1 и доводят до метки 1 см3 деионизированной водой.
Массовая концентрация аналита в растворе С4 составляет 1 нг/см3. Массовая концентрация внутреннего стандарта в растворе С4 составляет 40 нг/см3.
Срок хранения растворов при температуре от0 °С до 8 °С — не более 3 мес.
- Построение градуировочной характеристики
- Градуировочную характеристику строят при помощи матричной градуировки. Для этого проводят обработку «чистых» проб, не содержащих сульфаниламидов, нитроимидазолов, пенициллинов, амфениколов (см. 6.2.1), в зависимости от типа анализируемой матрицы. На стадии перерастворения остатка после упаривания элюата после твердофазной экстракции перед введением в хроматограф в анализируемую «чистую» пробу добавляют смеси градуировочных растворов анализируемых соединений и их внутренних стандартов (см. 6.2.4.5—6.2.4.7).
- Для получения градуировочных данных используют не менее четырех уровней массовых концентраций матричных градуировочных растворов. Определяемые в анализируемой пробе массовые концентрации анализируемых соединений должны находиться в диапазоне массовых концентраций градуировочной характеристики.
- При построении градуировочной характеристики для количественного определения остаточного содержания сульфаниламидов, нитроимидазолов, пенициллинов, амфениколов в инжектор хроматографа вводят по 50 мм3 и не менее двух раз градуировочные растворы (см. 6.2.4.5—6.2.4.7) различных уровней массовых концентраций. Фактические массовые концентрации рассчитываются с учетом чистоты стандарта и молекулярного веса соединения в диссоциированном состоянии. Используя программное обеспечение для сбора и обработки хроматографических данных, для анализируемых соединений устанавливают градуировочные характеристики в виде зависимостей отношения площадей хроматографических пиков соответствующего соединения к площади пика внутреннего стандарта от массовой концентрации соединения в пробе в соответствии с таблицей 1.
При построении градуировочной характеристики используют функцию, обеспечивающую наилучшее совпадение с матричными точками (отклонение массовых концентраций, вычисленных при помощи градуировочной характеристики, от известных массовых концентраций должно быть минимальным).
Градуировочная характеристика считается приемлемой, если рассчитанное значение квадрата коэффициента корреляции для градуировочной характеристики каждого фрагментного иона составит не менее 0,98.
Вычисление площади пика проводят для каждого дочернего иона анализируемых соединений. Допускается проведение количественных измерений по одному наиболее интенсивному дочернему иону. Для подтверждения наличия сульфаниламидов, нитроимидазолов, пенициллинов, амфениколов рассчитывают массовые концентрации по площадям пиков менее интенсивных дочерних ионов.