14
ультразвуковую баню на одну минуту. Полученный экстракт фильтруют через мембранный фильтр и используют для ВЭЖХ-МС/МС анализа.
- Порядок выполнения измерений
- ВЭЖХ/МС/МС анализ
Для определения остаточного содержания сульфаниламидов, нитроимидазолов, пенициллинов, амфениколов проводят ВЭЖХ-МС/МС анализ в условиях, указанных в 6.4.
ВЭЖХ-МС/МС анализ выполняют в виде серии измерений, включающей:
- образец мобильной фазы А;
- образец, полученный в условиях подготовки проб, где вместо матрицы использовался 1,0 г деионизованной воды;
-образец, приготовленный ранее в соответствии с требованиями раздела 7, в зависимости от типа анализируемой матрицы;
- градуировочные растворы;
- анализируемые пробы;
- образцы с известным содержанием анализов для контроля стабильности градуировки.
Если остаточное содержание сульфаниламидов, нитроимидазолов, пенициллинов, амфениколов в анализируемой пробе превышает значение максимального градуировочного уровня, то анализируемую пробу разводят в 10 или более раз мобильной фазой А и проводят повторные измерения.
- Контроль качества измерений
- Каждая серия измерений включает в себя несколько степеней подтверждения качества измерений.
- 10 мм3 градуировочного раствора С4 (см. 6.2.4.7) вводят в инжектор хроматографа. Полученное соотношение сигнал/шум для каждого аналита должно быть не менее 10.
- Для исключения контаминации пробы используемыми реагентами проводят обработку заведомо чистого образца в соответствии с разделом 7 в зависимости от типа анализируемой матрицы.
- Для учета матричного эффекта при расчете остаточных содержаний нитроимидазолов, сульфаниламидов, пенициллинов и амфениколов используют матричную градуировку (см. 6.3).
- Для исключения возможной контаминации реагентов, используемых в процессе подготовки проб, анализируемую пробу ткани заменяют 1,0 см3 деионизованной воды.
- Обработка результатов измерений
- Расчеты остаточного содержания сульфаниламидов, нитроимидазолов, пенициллинов, амфениколов и площади пика выполняются системой обработки данных в автоматическом режиме.
- Вычисление площади пика проводят длядвух дочерних ионов (таблица 2) длякаждогосульфа- ниламида, нитроимидазола, пенициллина, амфеникола. Отклонения относительных ионных интенсивностей ионов в анализируемой пробе от относительных ионных интенсивностей ионов, полученных при анализе градуировочных растворов, не должны превышать значений, указанных в таблице 3.
- За результат измерений принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости:
2|*1 -X2|100 <г (1)
(*1 + *2) ’
где X1, Х2 — результаты двух параллельных определений массовой доли аналитов, мкг/кг; r — значение предела повторяемости, % (г = 10 %).
Если условие (1) не выполняется, проводят еще два определения. За результат измерений принимают