11
Длина волны спектрофотометрического детектора: 210 нм.
Диапазон длин волн диодноматричного детектора: 200—600 нм.
Скорость потока подачи элюента: 0,8—1 см3/мин (ориентировочное значение).
Объем вводимой пробы: 5—10 мкл.
Время выхода органических кислот при ВЭЖХ характеризуется коэффициентом емкости K', который не зависит от скорости подачи элюента. Коэффициенты емкости рассчитывают по формуле
к' = (R - t0)/t0,
где tR — время удерживания аналита, мин,
t0 — мертвый объем колонки, мин.
Примерные значения коэффициентов емкости основных органических кислот, определяемых в соковой продукции, представлены в таблице 5.
- Условия проведения измерений
Измерения проводят при следующих лабораторных условиях:
- температура окружающего воздуха (25 + 5) °С;
- атмосферное давление (97 + 10) кПа;
- относительная влажность (65 + 15) %;
- частота переменного тока (50 + 5)Гц;
- напряжение в сети (220 + 10) В.
- Анализ проб
Проводят хроматографический анализ проб, подготовленных по 6.2. Анализ проводят на двух параллельных пробах при соблюдении всех остальных условий повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-1 (подраздел 3.14). Регистрируют площадь пиков органических кислот. В случае если массовая концентрация (массовая доля) органической кислоты в пробе настолько максимальна, что площадь соответствующего пика выходит за верхнюю границу диапазона градуировки хроматографа, то подготавливают новую пробу с другим разбавлением и измерение повторяют.
Перед проведением анализа хроматографическую систему кондиционируют подвижной фазой до установления стабильной базовой линии.
В случае взаимного влияния отдельных кислот друг на друга для более эффективного разделения допускается последовательное соединение двух колонок по 4.3 для хроматографического разделения всего перечня органических кислот по 4.21. В этом случае требуется построение дополнительной градуировочной зависимости для данной системы последовательно соединенных колонок.
Хроматографическая система должна обеспечивать удовлетворительное разделение основных пиков.
Примеры хроматограмм основных органических кислот приведены в приложении А.
- Обработка и оформление результатов определений
Массовую концентрацию (массовую долю) органических кислот рассчитывают по градуировочным зависимостям с учетом степени разведения пробы. Вычисления массовой концентрации или массовой доли проводят до третьего десятичного знака.