11
- ремешивают и фильтруют через складчатый бумажный фильтр. Измерения проводят по ГОСТ 23327 (раздел 6), используя вместо пробы продукта складчатый фильтр с его содержимым, при этом титрование проводят раствором соляной кислоты молярной концентрацией 0,01 моль/дм3.
Массу неденатурированных сывороточных белков т, мг, содержащихся в 1 г проб по 5.4.5, рассчитывают по формуле
где 0,14 — коэффициент пересчета объема соляной кислоты в массу неденатурированных сывороточных белков, мг/см3;
30 — масса смеси по 5.4.6.1, г;
V1 — объем раствора соляной кислоты, израсходованный на титрование аммиака, содержащегося в фильтре с осадком, см3;
V2 — объем раствора соляной кислоты, израсходованный на титрование аммиака, содержащегося в фильтре (холостая проба), см3;
2 — коэффициент пересчета на 1 г сухого обезжиренного молока;
т1 — масса фильтрата по 5.4.6.1, г.
За результат измерений принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений.
Вычисления проводят до второго десятичного знака с последующим округлением до первого десятичного знака.
- Для построения градуировочного графика по оси абсцисс откладывают определенные по формуле (1) значения масс неденатурированных сывороточных белков, по оси ординат — соответствующие им значения оптической плотности.
- Приготовление восстановленного продукта
- В стакан вместимостью 100 см3 помещают (2,0 + 0,1) г продукта, (8,0 + 0,1) г хлористого натрия и 20 см3 дистиллированной воды. Перемешивают вручную в течение 20 с. Стакан с подготовленной смесью помещают на водяную баню при температуре (37 + 1) °С на 30 мин. Через каждые 5 мин его извлекают из бани и интенсивно перемешивают вручную или на лабораторной вибромешалке в течение 20 с. Через 30 мин смесь фильтруют через складчатый бумажный фильтр. Если фильтрат непрозрачен, фильтрование повторяют.
- Затем смешивают 1 см3 фильтрата по 5.4.7.1 и 10 см3 раствора Б и тщательно перемешивают.
- Для приготовления раствора сравнения 1 см3 фильтрата, подготовленного по5.4.7.1, смешивают с 10 см3 раствора А.
- Условия проведения измерений
При выполнении измерений в лаборатории должны соблюдать следующие условия:
температура окружающего воздуха, °С (20 + 2);
относительная влажность воздуха, % от 30 до 80;
атмосферное давление, кПа (мм рт. ст.) от 84 до 106 (от 630 до 795).
- Проведение измерений
- В фотоколориметрическую кювету очень аккуратно, стараясь не испачкать стенки кюветы, помещают раствор, подготовленный по 5.4.7.2.
В другую фотоколориметрическую кювету (кювету сравнения) наливают раствор сравнения, подготовленный по 5.4.7.3.
- В дальнее гнездо кюветодержателя колориметра устанавливают кювету с раствором сравнения, по отношению к которому проводят измерение. Кювету с исследуемым раствором устанавливают в ближнее гнездо кюветодержателя.
Оптическую плотность анализируемого раствора определяют при длине волны максимального светопропускания (440 + 10) нм, для этого снимают 4—5 показаний и вычисляют среднеарифметическое значение результатов измерений.
- Обработка результатов измерений
По измеренному значению оптической плотности, используя градуировочный график, находят количество неденатурированных сывороточных белков в восстановленном продукте.