С. 6 ГОСТ 25999-83
За окончательный результат анализа принимают среднеарифметическое значение результатов
двух параллельных определений с доверительной вероятностью 0.95. допускаемое расхождение
между которыми не должно превышать: 0,008-10“3 % абс. при массовой дате витамина В, не более
0,050-10“ 3 %\ 0.020 10"3 % абс. —при массовой доле витамина В, батее 0.05010-3 %.
4. ЛЮМИНОФЛАВИНОВЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНА В2
4.1. С у щ н о с т ь метода
Сущность метода основана на кислотном и ферментативном гидролизе связанных форм
витамина, окислении пигментов марганцовокислым калием, облучении светом для перевода рибо
флавина в люмифлавнн. экстракции люмифлавина хлороформом и измерении интенсивности
флуоресценции при длинах ваш 360—480 нм возбуждающего и 510—650 нм излучаемого света.
Метод предназначен для анализа овощных консервов с мясом и крупами, а также темноокра-
шенных консервированных продуктов.
4.2. Ап п а р а т у р а , м ат е р и а л ы и р е а к т и в ы
Для проведения анализа применяют аппаратуру, материалы и реактивы, указанные в пп. 2.2;
3.2. с дополнениями, указанными ниже.
Вентилятор бытовой по ГОСТ 7402.
Лампа накаливания электрическая общего назначения по ГОСТ 2239*. мощностью 100,
150, 200 Вт.
Бюретки по НТД вместимостью 50, 100 см3.
Воронки лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336 диаметром 36 мм.
Воронки делительные стеклянные по ГОСТ 25336 вместимостью 250 см3.
Каабы лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336 плоскодонные или конические с взаимоза
меняемым конусом, вместимостью 100 см3.
Кислота серная по ГОСТ 4204. раствор с массовой долей 30 %.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328. раствор с молярной концентрацией с (NaOH) = 7 моль/дм3.
Натрий сернокислый по ГОСТ 4166, безводный.
Хлороформ технический по ГОСТ 20015, высшего сорта. Перед использованием измеряют
интенсивность флуоресценции. При наличии флуоресценции очищают перегонкой.
4.3. П о д г о т о в к а к а н а л и з у
Подготовку к анализу проводят по пп. 2.3.4; 3.3.1; 3.3.2.
4.4. П р о в е д е н и е а н а л и з а
4.4.1. Очистка гидролизата
В колбу вместимостью 250 см3 помешают 100 см3 анализируемого гидролизата, в другую —
100 см3 гидролизата контрольного опыта. В обе колбы прибавляют по 2.0 см3 раствора серной
кислоты. Затем пипеткой с делениями по каплям при постоянном перемешивании
прибавляют раствор марганцовокислого калиядо слабо-розового окрашивания, не исчезающего
втечение 1мин. Избыток розового окрашивания устраняют прибавлением по каплям раствора
перекиси водорода. Отмечают израсходованные объемы растворов марганцовокислого калия
и перекиси водорода. Полученный раствор переносят в делительную воронку вместимостью
250 см3, прибавляют 30— 50 см3 хлороформа и встряхивают 0,5 мин. Хлороформный слой
удаляют, а водный экстракт используют для анализа.
4.4.2. Облучение экстракта и получениелюмифлавина
В две колбы вместимостью 100 см3 каждая прибавляют по 20,0 см3анализируемого экстракта,
в третью —экстракт контрольного опыта. В колбу с анализируемым экстрактом прибавляют 2,0 см3
стандартного раствора рибофлавина с массовой концентрацией 0.001 г/дм3и затем во все колбы по
4.0 см3 раствора гидроокиси натрия с молярной концентрацией с(NaOH) = 7 моль/дм3.
Содержимое перемешивают, колбы закрывают пришлифованными пробками и облучают светом
электролампы мощностью 100—200 Вт с расстояния (30±1) см в течение 40 мин.
Температура раствора должна быть от 15 до 25 "С. Для охлаждения используют настольный
вентилятор. После облучения в колбы прибавляют по 4.0 см3ледяной уксусной кислоты, переме-
* На территории Российской Федерации в част ламп накаливания типов Б. В и Г действует ГОСТ
Р52706- 2007.
MS