С. 4 ГОСТ 25999-83
органический слой слипают в кювету для измерения интенсивности флуоресценции. Измеряют
сначала интенсивность флуоресценции стандартных растворов (окисленная и неокисленная форма),
затем анализируемых проб.
2.5. О б р аб о т к а р е з у л ь т ат о в
Массовую долю витамина В, (А",) в процентах вычисляют по формуле
(С - С. )
а ■К
•
V
-100
Х](Д
—Л,)
У, т
’
где С —интенсивность флуоресценции окисленной формы анализируемого раствора;
С, — интенсивность флуоресценции неокисленной формы анализируемого раствора;
Д
— интенсивность флуоресценции окисленной формы стандартного раствора;
Дх— интенсивность флуоресценции неокисленной формы стандартного раствора;
а — масса тиамина в 5 ем* стандартного раствора, взятая для окисления, г;
К — коэффициент пересчета тиамина бромида на тиамина хлорид, при использовании для
приготоатения стандартного раствора тиамина хлорида К - 1; тиамина бромида К= 1,17;
У— общий объем гидролизата, см5;
У, —объем элюата, взятый для окисления, см3;
т — масса навески продукта, г.
За окончательный результат анализа принимают среднеарифметическое значение результатов
двух параллельных определений с доверительной вероятностью 0.95. допускаемое расхождение
между которыми недолжно превышать: 0,004 10“3% абс. —при массовой дате витамина В, не более
0,050 10“ 3 %\ 0.060 10“ 3 % абс. —при массовой дате витамина В, более 0,050 IО-3 %.
3. РИБОФЛАВИНОВЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНА В:
3.1. С у щ н о с т ь метода
Сущность метода основана па кислотном и ферментативном гидролизе связанных форм
витамина, окислении пигментов марганцовокислым катнем, восстановлении рибофлавина гидро
сульфитом натрия и измерении интенсивности флуоресценции до и после восстановления при
длинах волн 360—480 нм возбуждающего и 510—650 нм излучаемого света.
Метод предназначен для анализа слабоокрашенных овощных, фруктовых и ягодных консер
вированных продуктов.
3.2. Ап п а р а т у р а , м ат е р и а л ы и р е а к т и в ы
Для проведения анализа применяют аппаратуру, материалы и реактивы, указанные в п. 2.2. со
следующими дополнениями.
Эксикатор вакуумный по ГОСТ 25336.
Катбы лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336 вместимостью 50 см3.
Водорода перекись по ГОСТ 10929. раствор с массовой долей 3 %. Срок хранения семь дней.
Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, раствор с массовой долей 3 %. Срок хранения
семь дней.
Кислота серная по ГОСТ 4204. раствор с массовой долей 93,6—95.6 %.
Натрия гидросульфит технический по ГОСТ 246.
Рибофлавин, растворы с массовыми концентрациями 0,02 и 0.001 г/дм3.
3.3. П о д г о т о в к а к а на л и з у
3.3.1. Приготовление стандартного раствора рибофлавина
Раствор готовят из рибофлавина следующим образом: предварительно высушивают рибофла
вин в вакуум-эксикаторе над концентрированной серной кислотой. Раствор с концентрацией
0.02 г/дм3 хранят в холодильнике в течение месяца. Раствор с концентрацией 0.001 г/дм3 готовят
в день проведения анализа.
Для приготоатения стандартного раствора рибофлавина с массовой концентрацией 0.02 г/дм3
в мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 0.020 г рибофлавина, прибавляют окато 750 см3
дистиллированной воды. 1.0 см3ледяной уксусной кислоты и слегка нагревают при
перемешивании до растворения. Затем раствор охлаждают до комнатной температуры, доводят до
метки дистилли рованной водой и снова перемешивают.
116