ГОСТ Р 51197-98
5 Реактивы
Все реактивы должны быть аналитического качества (не ниже х.ч.). Все растворы, кроме
растворов неорганических соединений (5.1 и 5.2), должны храниться в закрытой посуде из темного
стекла, тщательно вымытой и пропаренной или стерилизованной.
Вода, используемая для приготовления растворов ферментов, должна быть деминерализован
ной или бидистиллированной, полученной в стеклянном дистилляторе.
Вода, используемая для приготовления растворов химических реагентов и подготовки проб,
должна быть дистиллированной или деминерализованной.
П р и м е ч а н и е — Однократно дистиллированная вода может содержать ионы металлов, которые
снижают активность ферментов, а деминерализованная вода может содержать микроорганизмы, увеличиваю
щие неспецифическую <|юноиуюферментативную активность и искажающие результаты анализа.
Препарат НЛДФ должен содержать не менее 90 % основного вещества.
Допускается использовать имеющиеся в продаже готовые наборы реактивов при условии
соответствия их качества требованиям настоящего стандарта.
5.1 Раствор хлорной кислоты с (НСЮ4) = 0,4 моль/дм3
17,3см3 раствора хлорной кислоты массовой доли 70 % и плотности 1.67 г/см3 помещают в
мерную колбу вместимостью 500 см3 и доводят объем раствора до метки водой.
П р и м е ч а н и е —При использовании хлорной кислоты меньшей массовой доли проводят перерасчет
обьсма кислоты, используемого для (каждения белков.
5.2 Раствор гидроксида калия с (КОН) = 2 моль/дм3
Растворяют 56,1 г гидроксида калия в воде, доводят объем раствора до 500 см3.
5.3 Буферный раствор активной кислотности 8,0 pH
Растворяют 2.64 г глицилглицина (C4HxN;0 3) и 0.284 г хлорида магния гексагидрата
(MgCI, • 6Н,0) в 150 см3 воды. Устанавливают активную кислотность раствора 8,0 pH при 20 *С
раствором гидроксида калия (5.2). используя для измерений pH-метр. Доводят объем раствора до 200
см3.
Раствор устойчив не менее 1 мес при температуре 4 *С.
5.4 Раствор НАДФ
Растворяют 50 мг динатриевой соли i«икотинамидадениидинуклеотидфосфорной кислоты
(НАДФ-Na,) в 5,0 см3 воды.
Раствор устойчив не менее 1 мес при температуре 4 "С.
5.5 Раствор аденозим-5-трифосфа га (А’ГФ)
Растворяют 250 мг дннатрневой соли аденозин-5-трнфосфорной кислоты (ЛГФ-Na,) и 250 мг
гидрокарбоната натрия (NaHCO,) в 5.0 см’ воды.
Раствор устойчив не менее I мес при температуре 4 “С.
5.6 Суспензия 6-ФГДГ
Используют поставляемую в готовом виде суспензию 6-фосфоглюконатдегндрогеназы из дрож
жей. содержащую 6-ФГДГ концентрации 2.0 мг/см3 и удельной активности не менее 220 Е/см3, а
также глюконаткиназу и НАДФН-оксидазу массовых долей не более 0,05 % каждого.
Суспензия устойчива не менее 6 мес при температуре 4 *С.
5.7 Суспензия ГК
Используют поставляемую в готовом виде суспензию глюконаткиназы из E.coli, содержащую
ГК концентрации 1,0 мг/см3и удельной активности не менее 26 Е/см3и НЛДФН массовой доли не
более 0,05 %.
Суспензия устойчива не менее 6 мес при температуре 4 *С.
6 Средства контроля и вспомогательные устройства
Обычная лабораторная аппаратура, а также указанная в 6.1—6.11.
6.1 Мясорубка механическая лабораторная, снабженная перфорированной пластинкой с от
верстиями диаметром не более 4 мм.
6.2 Миксер лабораторный.
6.3 Центрифуга лабораторная с пробирками номинальной вместимостью 50 иди 100 см’.
2
112