ГОСТ Р 51128-98
6 Отбор и подготовка проб
Отбор проб —по ГОСТ 26313, подготовка их к испытанию —по ГОСТ 26671.
6.1 В ы д е л е н и еD-и з о л и м о и н о йк и с л о т ыи зф р у к т о в о г ои
о в о щ н о г ос о к а , н е к т а р о ви с о к о с о д е р ж а щ и х н а п и т к о в
В стакане для центрифугирования 10 см’ исследуемого образца смешивают с 5 см’ раствора
гидроокиси натрия. Раствор выдерживают в течение 10 мин при температуре от 20 до 25 *С. Мосле
добавления 5 см’ соляной кислоты объем раствора доводят водой до 25 см’. Последовательно
прилипают 2 см3 раствора аммиака, 3 см’ раствора хлористого бария и 20 см’ ацетона и хорошо
перемешивают стеклянной палочкой. Раствор выдерживают в течение 10 мин, затем втечение 5 мин
центрифугируют. Надосадочную жидкость осторожно декантируют, осадок в стакане для центри
фугирования растворяют в 20 см’ раствора сернокислого натрия, помешивая стеклянной палочкой.
Для ускорения растворения осадка стакан помещают на кипящую водяную баню и выдерживают
в течение 10 мин при неоднократном перемешивании. После охлаждения до температуры от 20 до
25 *С раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см’ и доводят буферным
раствором до метки. Из мерной колбы раствор переносят в колбу Эрленмайера, содержащую 1 г
активированного угля, выдерживают в течение 5 мин и фильтруют через складчатый бумажный
фильтр. Прозрачный, бесцветный фильтрат используют для ферментативного определения D-изо-
лимонной кислоты.
6.2 В ы д е л е н и еD-и з о л и м о н н о йк и с л о т ыи зк о н ц е н т р а
т о вф р у кт о п ы х и о и о ш н ы хс о к о в , н е к т а р о в и с о к о с о д е р
ж а ш и хн а п и т к о в
Перед выделением D-изолнмонной кислоты концентрат разводят водой до содержания сухих
веществ по рецептуре натурального сока, нектара или сокосодержашего напитка. Далее выделение
D-изолимонной кислоты проводят по 6.1.
7 Подготовка к испытанию
7.1 П р и г о т о в л е н и еб у ф е р н о г ор а с т в о р аа к т и в н о йк и с
л о т н о с т ь ю7,0 pH
2.42 г трис(гид роксиметил) аминометана и 35 мг динатриевой соли этилендиаминтетрауксус-
ной кислоты (дигидрата) растворяют в 80 см’ воды, значение pH раствора доводят с помощью
соляной кислоты до 7,0 и объем доводят до 100 см’. Буферный раствор устойчив при
температуре 4 *С в течение 1 г.
7.2 П р и г о т о в л е н и еб у ф е р н о г ор а с т в о р аа к т и в н о йк и с
л о т н о с т ь ю7,4 pH
2.42 г трис(гидроксиметил) аминометана и 35 мг динатриевой соли этнлендиаминтетрауксус-
ной кислоты (дигидрата) растворяют в 80 см’ воды, значение pH раствора доводят с помощью
соляной кислоты до 7,4, затем объем раствора доводят дистиллированной водой до 100
см’. Буферный раствор устойчив при температуре 4 ’С в течение 1 г.
7.3 П р и г о т о в л е н и ер а с т в о р а Н Л Д Ф
50 мг динатриевой соли НЛДФ растворяют в 5 см’ воды. Раствор устойчив при температуре
4 *С в течение четырех недель.
7.4 П р и г о т о в л е н и ер а с т в о р а И Ц Д Г
10.0 мг лиофилнзата ИЦДГ из свиного сердца растворяют в I см’ (20 Е/см’) глицерина.
Раствор устойчив при температуре 4 “С в течение 6 мес.
8 Проведение испытания
Анализ проводят при температуре от 20 до 25 ’С.
При проведении испытания количество реактивов задают в см’, а результаты пересчитывают
на 1дм’ пробы.
Для дозирования исследуемой пробы и растворов используют пипетки с делениями или
пипеточные дозаторы.
Растворы ферментов, кофермеитов и буфера вносят соответствующими пипеточными дозато
рами.
Ферментативное определение D-изолимонной кислоты может быть проведено также с исполь
зованием имеющихся в продаже специальных наборов реактивов.
1073