ГОСТ Р 51128-98
4 Сущность метода
Метод основан на осаждении D-изолимонной кислоты в виде соли бария, перерастворении
соли, ферментативном декарбоксилировании иона цитрата под действием НАДФ в присутствии
ИЦДГ, фотометрическом измерении количества образовавшегося НЛДФН, эквивалентного коли
честву D-изолимонной кислоты.
В ходе анализа протекают следующие ферментативные реакции:
ИЦДГ
0-изоцитрат-ион+НАДФ+----------> а-кетоглутарат+Н/\ДФН+С02+ Н ’.(1)
5 Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы
и материалы
-
Спектрофотометр, позволяющий проводить исследования при длине волны 340 нм, или
фотометр фотоэлектрический шириной спектральной полосы не более 10 нм и допустимой абсо
лютной погрешностью измерений коэффициента пропускания не более I %, или спектрофотометр
на ртутной лампе, позволяющий проводить измерения при длинах волн 365 или 334 нм.
Кюветы из оптического стекла или полистироловые рабочей длиной 10 мм.
Иономер или pH-метр с погрешностью измерения не более 0,05 pH.
Электрод для измерения pH стеклянный.
Электрод сравнения (каломельный).
Пипетки по ГОСТ 29227 типа 3, исполнения 1, 1-го класса точности, вместимостью I и 10см3.
Дозаторы пипеточные объемами 1, 0,2 и 0,02
c
m
j
относительной погрешностью дозирования
±
1
%
121
Колба мерная по ГОСТ 1770, исполнения 2, вместимостью 50 см3.
Центрифуга лабораторная, обеспечивающая увеличение ускорения свободного падения при
центрифугировании в 3000 раз.
Стаканы для центрифугирования вместимостью 100 см3.
Фильтры бумажные обеззоленные марки ФОМ по ГОСТ 12026.
Баня водяная |3|.
Кислота D-изолимонная по НД |4) раствор массовой концентрации /и(С(Н,О?)=500 мг/дм3.
Кислота соляная по ГОСТ 3118, х. ч.. раствор молярной концентрации с (НС1)=4 моль/дм3.
Аммиак водный по ГОСТ 3760, ч. д. а.
Ацетон по ГОСТ 2603, ч. д. а.
Барий хлористый 2-водный по ГОСТ 4108, х. ч., раствор массовой концентрации
/м(ВаС1,)=300 103 мг/дм3.
НатриягидроокисьпоГОСТ4328.ч. д.а.,раствормолярнойконцентрации
c(NaOH)=4 моль/дм3.
Натрий сернокислыйпоГОСТ 4166, ч. д. а., раствор массовойконцентрации
jw(Na,S04)=71 103 мг/дм3.
Марганец (II) сернокислый |5|, раствор массовой концентрации m(MnS04)=l2.5 К)’ мг/дм3.
Этилендиаминтетрауксусной кислоты динатриевая соль 2-водная по ГОСТ 10652, ч. д. а.
Трис(гидроксиметил)аминометан |6), х. ч.
Глицерин по ГОСТ 6259.
НАДФ (динатриевая соль) по |4|.
ИЦДГ |4|.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Допускается применять другие средства измерений с метрологическими характеристиками,
вспомогательные устройства с техническими характеристиками, а также реактивы по качеству не
ниже перечисленных.
2106