ГОСТ Р 51484-99
Взвешивают 30 г силикагеля (5.3.4) в коническую колбу вместимостью 250 см3 (6.3.10). При
ливают 60 см3волы. Закрывают пробкой и интенсивно встряхивают в течение 1мин. Сразу же вносят
суспензию в аппликатор (6.3.2). Наносят на очищенные пластинки слой толщиной 0.25 мм.
Оставляют пластинки высыхать не менее чем на 1 ч на воздухе.
В любом случае, подготовлены ли пластинки способом, описанным выше, или приобретены
готовыми, активируют пластинки в термостате (6.3.7) при 103 “С в течение 1 ч. Перед использова
нием пластинки охлаждают до комнатной температуры в эксикаторе (6.3.13).
Для уменьшения скорости продвижения кислот пластинки с силикагелем должны быть
пропитаны борной кислотой.
Испытуемая смесь должна быть разделена с помощью тонкослойной хроматографии как можно
скорее.
В связи с тем, что некоторые силикагели содержат органические вещества, которые могут
оказывать влияние на результаты в процессе хроматографического анализа, рекомендуется выпол
нять контрольное определение для того, чтобы убедиться, что силикагели не содержат таких веществ. В
противном случае заранее очищают подготовленные пластинки, помещая их в хроматографичес кую
камеру с растворителем (5.3.5) и дают растпорителю подняться до верха пластинки.
Допускается применение других хроматографических пластинок, по техническим характерис
тикам не хуже указанных.
8.4.2 Отделение 2-моноглицеридов
С помощью микрошприца (6.3.4) на подготовленную пластинку (8.4.1) наносят экстракт (8.3.5)
каплями в виде сплошной полосы, проходящей на расстоянии 15 мм от нижнего края пластинки.
Устанавливают пластинку в хроматографическую камеру (6.3.1), которая была предварительно
насыщена парами разделяющего растворителя (5.3.5). Закрывают камеру крышкой и осуществляют
хроматографирование веществ на пластинке до тех пор. пока фронт растворителя не достигнет
уровня на расстоянии 10 мм от верхнего края пластинки.
Хроматографическое разделение проводят при температуре 20 "С. Высушивают пластинку на
воздухе при температуре 20 *С и опрыскивают ее раствором индикатора (5.3.6), используя приспо
собление для опрыскивания (6.3.5). Отмечают полосу моноглицеридов (&■*= 0.035 приблизительно) в
ультрафиолетовом свете (6.3.8) и соскребают ее микрошпателем (6.3.6), избегая попадания в нее
компонентов с линии старта.
Если очищенные испытуемые пробы (8.2) были жидкими при комнатной температуре, поме
щают собранный силикагель в колбу для метилирования вместимостью 25 см3 (6.3.9) и выполняют
операции, описанные в 8.5.
Если очищенные испытуемые пробы (8.2) были твердыми при комнатной температуре,
переносят силикагель в коническую колбу вместимостью 50 см3 (6.3.11), содержащую 15 см3
диэтилового эфира. Интенсивно встряхивают и переносят содержимое на стеклянный пористый
фильтр (6.3.12). Промывают фильтр троекратно, используя каждый раз порцию по 15 см3 диэтило
вого эфира, и собирают фильтрат в колбу для выпаривания. Выпаривают эфирный раствор до обьема
4—5 см3 и переносят его в предварительно взвешенную круглодонную колбу вместимостью 25 см3
(6.3.9). Затем выпаривают растворитель в токе азота. Взвешивают остаток. Полученное количество
моноглицеридов должно колебаться от К)до 30 % от массы испытуемой пробы. Если результат иной,
повторяют гидролиз триглицеридов (8.2) или проверяют активность липазы (см. приложение А).
8.5 Анализ 2-мопоглнцерилов с помощью газовой хроматографии
Готовят метиловые эфиры жирных кислот из моноглицеридов, подвергая собранный силика
гель (или экстракт моноглицеридов из силикагеля) процедуре, установленной ГОСТ Р 51486,
используя метод, пригодный для нейтральных жиров и масел. Проводят газохроматографический
анализ метиловых эфиров по ГОСТ Р 51483.
9 Обработка результатов
Рассчитывают отношение массы метилового эфира каждой жирной кислоты в положении 2.
выраженное в процентах, к общей массе метиловых эфиров жирных кислот в 2-моноглицеридах.
Результаты записывают с точностью до первого десятичного знака.
5166