ГОСТ Р 51459-99
6.1.3 Раствор Б гидроокиси натрия концентрации 1.0 моль/дм3
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 40,0 г гидроокиси натрия (NaOH) по 4.16. рас
творяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
6.1.4 Раствор В гидроокиси натрия концентрации 0,1 моль/дм’
Вмерную колбу вместимостью 1000 см’ вносят 4,0 г гидроокиси натрия (NaOH) по 4.16. рас
творяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
6.1.5 Раствор хлористого цинка
В мерную колбу вместимостью 1000 см’ вносят 0,80 г хлористого цинка (ZnCl,) по 4.17, рас
творяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
6.1.6 Буферный растворе pH 7,8
В мерную колбу вместимостью 1000 см’ вносят 71.3 г диглицина (H,NCH,CONHCH,CO,H)
по 4.18, растворяют в 700 см3воды, доводят pH до 7,8 раствором А гидроокиси натрия (6.1.2).При-
ливают 100 см3раствора хлористого цинка (6.1.5), доводят объем раствора водой до метки и
переме шивают. Буферный раствор хранят при температуре от 0 до 8 ‘С не более четырех недель.
6.1.7 Раствор натрия углекислого кислого
В мерную колбу вместимостью 1000 см’ вносят 4.0 г углекислого кислого натрия по 4.19. рас
творяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
6.1.8 Раствор восстановленного никотннамидадениндинуклеотида
Вколбу вместимостью 50 см’ вносят 50 мг восстановленной динатриевой соли никотинамида-
дениндинуклсотида (C21HJ7N70 14P,Na2), 100 мг натрия углекислого кислого (6.1.7) и растворяют в
10 см’ воды.Раствор хранят при температуре от 0 до 8 *С не более четырех недель.
6.1.9 Раствор сернокислого аммония молярной концентрации 3.2 моль/дм’
Вмерную колбу вместимостью 1000 см’ вносят 422.4 г сернокислого аммония по 4.21. раство
ряют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
6.1.10 Суспензия мататдегидрогеназа/лактатдегндрогеназа
Вколбу вместимостью 100см’ вносят малатдегидрогеназу из сердца поросенка по 4.22. растворя
ют в растворе сульфата аммония (6.1.9) с pH 6,0 и добавляют лактатдегидрогеназу из мышц кролика по
4.23 с pH 7.0 до получения суспензии.Затем суспензию разбавляют раствором сернокислого
аммония (6.1.9) так, чтобы получить раствор, содержащий 600 единиц активное™ МД Г и 1400
единиц актив ности ЛДГ в 1см’ раствора. Раствор хранят при температуре ог 0 до 8‘С не более
одного года.
6.1.11 Раствор нитрат-лиазы
Растворяют нитрат-лиазу по 4.24 в ледяной воде так, чтобы получить раствор с активностью
40 ед.фермента в I см3.Раствор хранят при температуре от 0 до 8 *С не более одной недели.Раствор
хранят при температуре хранения минус 20 ‘С не более четырех недель.
6.1.12 Стандартный раствор лимонной кислоты
В мерную колбу вместимостью 1000 см’ вносят 1.600 г моногидрата лимонной кислоты
(С6Н,0, Н20) по 4.25, растворяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
При использовании суспензии с другой активностью ферментов объем суспензии в схеме отбора
пипеткой (8.2. Г) следует пропорционально увеличивать или уменьшать.
6.1.13 Проверка качества растворов и настройки спектрофотометра
Проверку проводят при хранении растворов (6.1.1—6.1.12) более двух недель.Пипеткой отме
ряют в каждую из двух мерных колб вместимостью 100 см’ соответственно 5.0 и 10.0см’стандартно
го раствора лимонной кислоты (6.1.12), добавляют по 10 см’ раствора трихлоруксусной кислоты
(6.1.1), доводят объем водой до метки и перемешивают.Массовуюдолю лимонной кислоты в обоих
растворах определяют в соответствии с 8.1.3, 8.2.3.
Массовую долю моногидрата лимонной кислоты в стандартном растворе,
Хг %,
вычисляют
по формуле (3), используя следующие величины:
М
= 210,1 г/моль (молекулярная масса моногидрата лимонной кислоты);
Г5= 1000 см3(6.1.12);
Уь
= 5 см’ и К) см’ по 6.1.13;
Г, = 100 см’ по 6.1.13.
Значение А, для обоих растворов должно быть (100±5)
%.
Если результат измерения не находится в данных пределах, следует проверить реактивы, пи
петки, спектрофотометр и принять меры для получения необходимого результата.
6.2 Подготовка проб
6.2.1 Сыр и плавленый сыр
От пробы сыра отделяют корковый (при наличии поверхностный заплесневелый) слой так.
чтобы получить порцию сыра массой не менее 50 г.Отобранную пробу сыра измельчают на измель-
51
3