ГОСТ Р 70145—2022
Время фиксации при температуре (22 ± 1) °С составляет 24 ч. Понижение температуры фиксации на
10 °С увеличивает продолжительность фиксации в два раза.
9.3.1 Ускоренную фиксацию проводят по ГОСТ 31479—2012 (пункты 8.1.3, 8.1.4).
Образец, фиксированный в растворе формалина в достаточной степени, должен быть равномер
но уплотненным и иметь одинаковый вид как на внешней стороне, так и на свежем срезе.
Фиксированные образцы хранят при температуре (22 ± 1) °С в плотно закрытой посуде в растворе
формалина с массовой долей формальдегида 10 %, взятом в пятикратном объеме, в течение не менее 6
мес.
9.4 Промывка образцов
Зафиксированные образцы или их кусочки (обычная или ускоренная фиксация) помещают в кол
бу или стакан со вставленной стеклянной воронкой, промывают холодной проточной водой в течение
15 мин. Если материал достаточно плотный, срезы изготавливают на замораживающем микротоме сра зу
же после промывки.
9.5 Уплотнение образцов
Для получения срезов из образцов мясопродуктов высокой рыхлости используют их уплот
нение в желатине. Для этого после завершения фиксации из образцов вырезают кусочки размером
15 х 15 х 4 мм и промывают водой. Хорошо промытые кусочки пропитывают 12,5 %-ным раствором
желатина, взятом в пятикратном объеме, в течение 6 ч, потом 25 %-ным раствором желатина в
течение 12 ч, взятом в пятикратном объеме, в термостате при температуре 37 °С. Затем кусочки
раскладывают в чашки Петри, заливают их свежим 25 %-ным раствором желатина и быстро охлаждают
в холодильни ке при температуре (5 ± 1) °С. После охлаждения кусочки уплотняют в растворе
формалина с массовой долей формальдегида 20 %, взятом в восьмикратном объеме, в течение 12 ч.
Перед резкой на микро томе кусочки промывают по ГОСТ 31479—2012 (подраздел 8.2).
Срок хранения кусочков в растворе формалина с массовой долей формальдегида 10 %, взятом в
пятикратном объеме, при комнатной температуре — не менее 6 мес.
9.6 Изготовление срезов
Из фиксированных образцов вырезают кусочки по ГОСТ 31479—2012 (пункт 8.4.1).
С микротомного ножа с помощью тонкой кисточки срезы переносят в кристаллизационную чашку
или чашку Петри с водопроводной водой. Под неповрежденный срез быстро подводят предметное стек
ло, обработанное яичным белком с глицерином. Срез извлекают из воды на середину стекла,
удержи вая его там препаровальной иглой. Затем срез накрывают сухой фильтровальной бумагой и,
прижимая бумагу ребром ладони, наклеивают его на предметное стекло. После того как
фильтровальную бумагу убирают, срез должен быть неповрежденным. Допускается переносить срезы
с микротомного ножа на предметное стекло с готовым адгезивным покрытием.
9.7 Окрашивание срезов
Окрашивание гкематоксилин-эозином (общая окраска) проводят по ГОСТ 31479—2012 (пункт 8.5.1).
9.7.1 Заключение срезов под стекло
Заключение срезов под стекло проводят по ГОСТ 31479—2012 (подраздел 8.6).
10 Проведение исследования и обработка результатов
10.1 Приготовленные гистологические препараты рассматривают под световым микроскопом
проходящего света. Сначала используют обзорные план-объективы — 10-кратные или менее, а за тем
— объективы со средним увеличением — до 40-кратного. Окуляры применяют с 10- или 15-кратным
увеличением. Для получения достоверных результатов необходимо исследовать не менее чем по два
среза с каждого из трех кусочков, отобранных от каждого образца.
10.2 При проведении идентификации животных соединительнотканных белков в исследуемом
препарате следует придерживаться общей последовательности визуальной оценки микроструктуры в
соответствии с ГОСТ 31479—2012 (пункт 9.3).
10.3 В ходе визуальной оценки гистологического препарата под световым микроскопом опреде
ляют наличие животных соединительнотканных белков. При этом необходимо учитывать особенности
5