ГОСТ Р 57480—2017
Приготовление:
26.6 г сухой среды растворяютв 1000 см3дистиллированной воды. Тщательноперемешивают, при
необходимости нагревают до полного растворения порошка. Стерилизуют при температуре 116 ’С в
течение 15 мин. Показатель pH должен соответствовать (5.1 ± 0.2)ед. pH при 25 ’С.
8.5 Мясо-пептонный агар — по ГОСТ7702.2.0.
8.6 Сухие агглютинирующие адсорбированные поливалентные О-сыворотки. Vi-. Н-агглютиниру-
ющие сыворотки — в соответствии с инструкцией изготовителя.
8.7 Питательные среды перед использованием контролируют по ГОСТ IS 011133.
8.8 Контроль сред на стерильность
Среды проверяют на стерильность путем выдержки в термостате при (37 ♦ 1) °С в течение 48 ч.
Если после этого на плотных питательных средах не обнаруживаются колонии микроорганизмов, а
в жидких средах нет помутнения или осадка, свидетельствующих о росте микроорганизмов, они счита
ются стерильными.
9 Проведение анализа
9.1 Предварительное обогащение в нссслоктивной среде
Дляприготовленияисходнойсуспензии используютнеселективную средусселективнойдобавкой.
Передиспользованием неселективную средупо8.2 вместесселективнойдобавкойпо8.3 нагрева
ют наводянойбанедотемпературы (41.5
а
1.0) °С. Подготовленную средудля неселективногообогаще
нияс селективнойдобавкой в асептическихусловиях инокулируют пробой продукта массой (25 ± 0.1)г в
пакеты сфильтром. Соотношениемеждуколичеством высеваемой пробыи количеством неселективной
среды — 1:9.т.е.(25 i 0.1)г пробына(225
1
0.1)см3среды. Тщательногомогенизируютвтечение2мин.
Для пробокружающей среды соотношение между количеством высеваемой пробы и количеством
неселективной среды — 1:9. т. е. губка на (225
а
0.1) см3среды.
Посевы инкубируют при{41.5 А 1,0) °С в течение(18—24) ч.
9.2 Обогащение вселективной среде
Культуры из среды для предварительного неселективного обогащения пересевают в среду селек
тивного обогащения — бульон Раппапорта-Вассилиадиса (R-VR10)(
cm
. 8.4).
Для этого 0.1 см3культуры, полученной по 9.1. пересевают в (10 i 1.0) см3бульона Раппапор
та-Вассилиадиса (R-V R10) по8.4.
Посевы на бульоне Раппапорта-Вассилиадиса (R-V R10) инкубируют при температуре
(41,5 ± 1,0) °С в течение (8—24)ч.
Допускается высевать культуры из среды неселективного обогащения проб продуктов, готовых к
употреблению, непосредственнонадифференциально-диагностическую среду(тест-пластину), исклю
чая этап обогащения в селективной среде на бульоне Раппапорта-Вассилиадиса (R-V R10).
9.3 Пересев надифференциально-диагностические среды
После инкубирования на селективной среде — бульоне Раппапорта-Вассилиадиса (R-V R10),
проводят высев посевного материала надифференциально-диагностическую среду.
Дляполученияотдельныххорошоизолированныхколонийбактериологическойпетлейдиаметром
3мм3берутпосевной материал ипроводятвысевнепрерывным штрихомнаповерхностьгелятест-плас
тины. Рукой в перчатке проводят разглаживающим движением по поверхности пленки тест-пластины,
оказывая на нее равномерноедавление, для удаления пузырьков воздуха изобласти высева.
Тест-пластины инкубируют пленкой вверх при температуре (41.5 ♦ 1.0) °С в течение (24
а
2) ч,
укладывают встопки в количестве не более20 пластин.
После инкубирования проводят просмотр тест-пластин на присутствие типичных колоний для
бактерий рода Salmonella.
Бактерии рода Salmonellaобразуют на тест-пластине колонии цвета от красногодо коричневого с
желтой зоной и/или пузырьком газа.
При отсутствии типичных колоний в посевахнадифференциально-диагностической среде работу
с посевами прекращают, и конечный результат определяют как отсутствие бактерий рода Salmonella
в анализируемой пробе (массе, объеме) продукта.
4