ГОСТ Р 57163—2016
5.4.3.2 Для каждой анализируемой пробы (разбавлений, концентраций) подготавливают кон
трольную пробу следующим способом: в емкости вместимостью не менее 5 дм3вносят по 5 дм3культи
вационной воды no В.1 (приложение В) и помещают по 10 шт. суточных тест-организмов.
При тестировании используют по три емкости для каждой концентрации вещества (разбавления
водной вытяжки) и контрольной пробы.
П р и м е ч а н и е — Плотность посадки тест-организмов — 1 шт. на 0,5 дм3.
5.4.3.3 Тестирование проводят в течение 96 ч (см. 5.1) в аквариальной (помещении) при темпе
ратуре (25
1
2) °С и попеременном воздействии света и темноты:
- 16 ч — при равномерном белом освещении вдиапазоне от 500 до 1000 лк,
- 8 ч — при отсутствии освещения.
5.4.3.4 Через каждые 24 ч тестирования подсчитывают количество выживших тест-организмов в
каждой емкости (включая контрольную).
5.4.3.5 После окончания тестирования.
- измеряют pH в каждой емкости с анализируемой и контрольной пробой;
- измеряют количество растворенного кислорода в каждой емкости с анализируемой и контроль
ной пробой:
- визуально осматривают в каждой емкости состояние тест-организмов.
Любые обнаруженные отклонения регистрируют.
5.4.4 Результаты тестирования считают достоверными, если соблюдаются следующие условия:
а) гибель тест-организмов в контрольной пробе в конце тестирования не должна превышать
10
% ;
б) ЛК50 за 24 ч модельного токсиканта двухромовокислого калия находится в пределах, указан
ных в 5.3.2.4.
Если условия а)—б) не соблюдаются, то находят причины несоответствия, устраняют их и тести
рование повторяют с новой культурой тест-организмов.
5.5Обработка результатов
5.5.1 По результатам подсчета выживших тест-организмов для каждого заданного разбавления
(концентрации) анализируемой пробы потрем емкостям, втом числе итрем контрольным, рассчитыва
ют среднеарифметическое значение выживших тест-организмов.
5.5.2 Определение токсичности анализируемых проб
5.5.2.1 Токсичность анализируемых проб (А, %) определяют по гибели тест-организмов для каж
дого заданного разбавления (концентрации) анализируемой пробы, относительно контрольной пробы,
после 96 ч тестирования и рассчитывают по формуле
А = *’ _*^100,О)
где х„ — среднеарифметическое значение количества выживших тест-организмов вконтрольной про
бе. шт. (по 5.5.1);
7Э„ — среднеарифметическое значение количества выживших тест-организмов для каждого задан
ного разбавления (концентрации) анализируемой пробы, шт. (по 5.5.1).
5.5.3 Определение значения средней эффективной кратности разбавления (концентра
ции)
5.5.3.1 Для каждого заданного разбавления (концентрации) анализируемой пробы рассчитывают
процент снижения выживаемости тест-организмов после 96 ч тестирования по отношению к выживае
мости тест-организмов в контрольной пробе, используя полученные по 5.5.1 среднеарифметические
значения и формулу (1).
По полученным значениям процентов снижения выживаемости тест-организмов определяют кон
кретное значение средней летальной кратности разбавления (концентрации) пробы, вызывающее 50
%-ное снижение выживаемости тест-организмов 96 ч ЛКР50(96 ч ЛК50). Пример определения ЛКР50
приведен в А.З (приложение А).
При необходимости определяют:
- минимальную кратность разбавления (концентрацию) пробы, соответствующую 100 %-ной
гибели тест-организмов за 96 ч тестирования;
- максимальную кратность разбавления (концентрацию) пробы, соответствующую 0 %-ной гибе
ли тест-организмов за 96 ч тестирования.
и