ГОСТ ISO 15914—2016
8.4.3 Проведение анализа 2
В остаток в стеклянной центрифужной пробирке (6.15) помещают 15 стеклянных шариков (6.16).
В пробирку с помощью раздаточного устройства/разбавителя, при непрерывном перемешивании на
мешалке (6.13), добавляют 10.0 см3 водного ДМСО до получения суспензии без комочков.
Пробирку закрывают завинчивающейся крышкой.
П р и м е ч а н и е — Энергичная гомогенизация при добавлении ДМСО необходима для предотвращения
образования микрогеля и/или комочков. Микрогель и комочки приводят к ошибочному результату определения со
держания крахмала.
Пробирку помещают в штативе в горизонтальном положении в кипящую водяную баню (6.14) и
встряхивают в течение 30 мин. После охлаждения в нее пипеткой (6.6)добавляют 1.7 см3 концентриро
ванной соляной кислоты (5.3) итщательно перемешивают. Пробирку закрываюти помещают в водяную
баню при температуре (60
±
1) °С. встряхивают втечение 30 мин. При этом происходитчастичный гидро
лиз крахмала. Далее анализ выполняют по 8.4.4.
8.4.4 Регулирование значения pH
Пробирку охлаждают и ее содержимое переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 (6.12).
Добавляют5 см3водного растворагидроксида натрия(5.4)и 2,5см3буферауксуснокислогонатрия (5.7),
раствор гомогенизируют. Измеряютзначение pH раствора на рН-метре (6.5). При необходимости значе
ние pH устанавливают до (4,8 i 0.1) ед. pH разбавленной соляной кислотой или гидроокисью натрия.
Смывают раствор иприставшие с ним частички пробы сэлектродов pH-метра водой в туже мерную кол бу
и доводят объем раствора до метки водой.
8.5 Ферментативное разложение крахмала в глюкозу
Сразу после гомогенизации пипеткой (6.6) переносят 5,00 см3 (этот объем в формуле расчета
содержания крахмала по 9.2 соответствует объему, обозначенному как V,) гомогенизированного рас
твора расщепленного и частичноразложенного крахмала (8.4.4) в чистую и сухую стеклянную пробирку
(6.11). Пипеткой(б.б)добавляютО, 125 см3раствора ферментаAMГ(5.12). Закрываютпробиркузавинчи
вающейся крышкой итщательно гомогенизируют. Раствор инкубируют в водяной бане при температуре 60
°С в течение времени не менее 16 ч. Для инактивации АМГ пробирку помещают в кипящую водяную баню
на 15 мин. Пробирку охлаждаютдо комнатной температуры и добавляют пипеткой 0.125 см3 рас твора
железистосинеродистого калия (5.9.1) и встряхивают в течение 1 мин. Добавляют пипеткой
0.125см3раствора уксуснокислогоцинка (5.9.2)и снова встряхивают втечение 1мин. Впробиркесодер
жится 5,375см3раствора(который равен V2прирасчетахв 9.2). Затем центрифугируютв течение 10мин с
радиальным ускорением не менее 3000 д. Надосадочную жидкость переносят в чистую и сухую
пробирку.
Для проверки полноты гидролиза крахмала в центрифужную пробирку добавляют несколько см3
воды, кипятят втечение 10мин, охлаждаютивносят0.2 см3 раствора йода. Голубаяокраска показывает
наличие крахмала, что означает его неполное разложение. В случае наличия крахмала анализ данной
пробы повторяют (см. 8.1).
8.6 Ферментативное определение содержания глюкозы
8.6.1 Пробы с содержанием крахмала 200—1000 г/кг
В отдельные чистыесухие пробирки помещают по0.5 см3каждого из растворов гидролизованного
крахмала (8.5), холостой пробы (8.3), три стандартных раствора глюкозы (5.11.1)иводу(5.1). Впробирки с
помощью дозатора/разбавителя (6.9) приливают по 9,5 см3воды (5.1) и гомогенизируют.
8.6.2 Пробы с содержанием крахмала 40—200 г/кг
Отбирают пипеткой по 0.5 см3растворов гидролизованного крахмала (8.5). холостой пробы (8.3),
трехстандартных растворов глюкозы (5.11.2) иводы(5.1)вотдельнуючистую сухуюпробирку. Отобран
ныерастворы разбавляютпри помощидозатора/разбавителя(6.9)с 1.5см3воды (5.1) и гомогенизируют.
Если ожидается низкое содержание крахмала (менее 200 г/кг), для повышения чувствительности
определения используютдругое соотношение разбавления для ферментативного гидролиза крахмала
в глюкозу. Такое же разбавление необходимо соблюдать и для холостой пробы.
Готовят стандартные растворы глюкозы сравнительно более низкой концентрации и разбавляют
стандартные растворы так же. как и растворы анализируемой и холостой проб.
Колориметрические измерения холостой пробы (8.3), воды (5.1) и трех стандартных растворов
глюкозы проводят дважды. Анализируемые пробы, содержащие гидролизованный крахмал, измеряют
один раз.
Пипеткой(6.6)переносятпо0.4 см3разбавленныхрастворованализируемойпробы, холостой про
бы, разбавленных стандартных растворов глюкозы и воды в чистые сухие центрифужные пробирки.
5