ГОСТ ISO 15914—2016
5.11.2Стандартные растворы глюкозы, используемые при анализе проб, содержащих
крахмал в пределах 40—200 г/кг
Готовят тристандартных раствора глюкозы с[С6Н12Ов] =0.0039 моль/дм3.В каждой мерной колбе
вместимостью 500 см3 растворяют в воде (350 i 1) мг безводной глюкозы. Доводят объем раствора до
метки водой.
Ежедневно готовят свежие стандартные растворы глюкозы.
5.12 Раствор амилоглюкозидазы (АМГ), 160 единиц/см3
Амилоглюкозидазу (АМГ) массой 267 мг [ЕС 3.2.1.3 (Aspergillus niger. Roche Diagnostics,
No 1202367,6 U/mg)]1)растворяют в смеси 9 см3 воды и 1см3буфера уксуснокислого натрия (5.7). При
хранениии использованиифермента необходимотщательнособлюдатьрекомендациипроизводителя.
Если используется другойфермент, следуетучитывать его активность, какуказано в примечании.
В этом случае необходимую массу фермента, достаточную для разложения крахмала, определяют в
соответствии с его активностью.
П р и м е ч а н и е — Различные поставщики фермента используют различные обозначения единиц актив
ности фермента. В настоящем стандарте использовано следующее обозначение единицы активности фермента
АМГ — 1 единица амилоглюкозидазы, способная выделять 1 мкмоль глюкозы из гликогена за 1 мин при 25 ‘С и
pH = 4.75 ед. 10 си1 раствора фермента достаточно для 75 определений.
5.13 Набор реактивов для определения концентрации D-глюкозы ферментативным гексо-
киназным УФ-методом (R-Biopharm, No. 716251f*. Согласно инструкции производителя неиспользо
ванныенаборы можно хранитьв течение года при температуре4 °С. Реактивы, включенныев набори их
приготовление при проведении анализов по 5.13.1 и 5.13.2.
5.13.1 Раствор буфер/субстрат (склянка 1)
Содержимое склянки 1растворяют в45 см3 воды. Реактивхранят в притемпературе4 вСв темном
месте в течение не более четырех недель и используют при комнатной температуре.
5.13.2 Раствор фермента (склянка 2)
Раствор готов для использования.
5.13.3 Окрашивающий раствор
Смешивают22.5 см3растворабуфер/субстрат(5.13.1)с95см3воды и0,45см3растворафермента
(5.13.2)игомогенизируют. Полученное количество растворадостаточнодля проведенияприблизитель
но 40 измерений. Используют только свежеприготовленные окрашивающие растворы при комнатной
температуре.
6 Оборудование, посуда и вспомогательные материалы
6.1 Аналитические весы с точностью взвешивания 0.1 мг.
6.2 Центрифуга с ускорением (180л 10) д и3000д, подходящаядля пробироксзавинчивающими
ся крышками вместимостью 12 см3 (значение д дается на дне пробирки).
6.3 Водяная баня, поддерживающая температуру (100
±
2) вС.
6.4 Водяная баня, поддерживающая температуру (60 i 1) °С.
6.5 pH-метр градуированный с комбинированным стеклянным электродом точностью изморения
0.01 ед. pH.
6.6 Микропипетки градуированные с регулируемым объемом раствора: 40—200 мкдм3,
200—1000 мкдм3, 1—5 см3 идозатор с регулируемым объемом раствора 1—5 см3.
6.7 Спектрометр с проточной кюветой, позволяющий проводить измерения при длине волны
340 нм.
6.8 Ротационный шейкер счастотойвращения 50об/миндля центрифужныхпробироксзавинчи
вающимися крышками (6.11).
6.9 Дозатор/разбавитель Hook&Tucker Compudil D3>.
6.10 Сушильный шкаф с принудительной вентиляцией воздуха.
6.11 Стеклянные центрифужные пробирки, 100 х 16 мм. с завинчивающимися крышками, под
ходящими к резиновым пробкам, покрытым фторопластом.
11 Roche Diagnostics No. 1202367 является примером имеющегося в продаже подходящего продукта. Эта ин
формация предоставляется для удобства пользователей настоящего стандарта.
2) R-8iopharm AG No. 716251 является примером имеющегося в продаже подходящего продукта. Эта инфор
мация предоставляется для удобства пользователей настоящего стандарта.
3) Hook&Tucker Compudil D является примером имеющегося в продаже подходящего продукта. Эта информа
ция предоставляется для удобства пользователей настоящего стандарта.
3