ГОСТ 33821—2016
бирки. Пробирки с эмульсией центрифугируют при 4000 об/мин в течение 30 мин. После этого линейкой
измеряют высоту столба прозрачной фракции в верхней части пробирки.
6.5.2 Обработка результатов
Эмульсию считают стабильной, если после центрифугирования в каждой из трех пробирок в про
цессе визуального контроля не обнаружено никаких изменений содержимого или если высота столба
прозрачной фракции, сформировавшейся в верхней части пробирки, не превышает 10 %.
6.6 Определение кинематической вязкости
6.6.1 Проведение испытания
Кинематическую вязкость определяют с помощью вискозиметра по ГОСТ 10028 по инструкции,
приложенной к прибору.
6.6.2 Обработка результатов
Кинематическая вязкость вакцины должна быть не более 200 мм2/с.
6.7 Определение полноты инактивации
6.7.1 Подготовка к испытанию
6.7.1.1 Приготовление суспензии эритроцитов крови петуха
Кровь петуха берут из подкрыльцовой вены. Поверхность на месте взятия крови предваритель
но дезинфицируют 70 %-ным этиловым спиртом. Кровь отбирают в стерильную пробирку с 3 %-ным
раствором лимоннокислого натрия в 0.9 %-иом растворе натрия хлорида изотонического в соотноше
нии 1:2; три раза центрифугируют при частоте вращения ротора 1500 об/мин в течение 10 мин. Из
осадка отмытых эритроцитов готовят 5 %-ную суспензию на 0.9 %-ном растворе натрия хлорида
изо тонического.
6.7.1.2 Приготовление объединенной пробы вакцины
Из трех флаконов с вакциной отбирают равные объемы вакцины и объединяют в одном стериль
ном флаконе, тщательно смешивают и используют для заражения эмбрионов.
Примечание — Изфлаконов в расфасовкепо 10 см3используют все содержимое.
6.7.2 Проводоние испытания
Полноту инактивации вируса определяют методом трехкратных последовательных пассажей
вакцины на 9—10 сут эмбрионах кур. Объединенную пробу вакцины инокулируют в аллантоисную по
лость 15 эмбрионам в объеме 0,2 см3. Контролем служат пять незараженных эмбрионов. Эмбрионы
инкубируют в термостате в течение 120 ч при температуре (37 ± 0.5) °С и относительной влажности 60
%—70 % и ежедневно овоскопирируют. Гибель эмбрионов в первые 24 ч считают неспецифической. По
окончании инкубации эмбрионы охлаждают при температуре от 2 °С до 8 вС в течение 12 ч. асеп тически
вскрывают, отбирают пробы экстраэмбриональной жидкости и исследуют в капельной реакции
гемагглютинации (РГА) с 5 %-ной суспензией эритроцитов петуха. Если результат отрицательный, то
проводят еще два дополнительных пассажа, используя для заражения смесь экстраэмбриональной
жидкости, отобранную в равных объемах от каждого эмбриона. При положительной РГА проводят по
вторный пассаж на удвоенном количестве эмбрионов. При подтверждении положительного результата
РГА данную серию бракуют.
6.7.3 Обработка результатов
Вирус, входящий в состав вакцины, считают инактивированным, если в течение последователь
ных пассажей гибель куриных эмбрионов отсутствует, а капельная РГА — отрицательная.
6.8 Определение безвредности
6.8.1 Общие принципы
Общие принципы определения безвредности по ГОСТ 31926.
6.8.2 Проводоние испытания
Объединенную пробу вакцины вводят 10 цыплятам по 1.0 см3 подкожно в дорсальную область
нижней трети шеи. Срок наблюдения — 14 сут.
6.8.3 Обработка результатов
Вакцину считают безвредной, если все цыплята в течение 14 сут останутся живыми, без клиниче
ских признаков болезни. При вскрытии птицы на месте введения вакцины не должно быть выраженной
воспалительной реакции.
7