ГОСТ 33486— 2015
7.2.7 Приготовление «холостой пробы»
Приготовление «холостой пробы» проводят в условиях подготовки проб, где вместо матрицы
используют 1,0 см3деионизованной воды.
7.3 Очистка подготовленных проб методом ТФЭ
Картриджи для твердофазной экстракции кондиционируют на вакуумном устройстве для ТФЭ.
пропуская последовательно 6 см3 метанола. 1 см3 деионизованной воды. 3 см3 фосфатного
буферного раствора (см. 6.2.4). Затем пропускают через картридж пробу, полученную в соответствии с
7.2.1— 7.2.7. Промывают картридж последовательно два раза 2 см3фосфатного буферного раствора
(см. 6.2.4). 1 см3 раствора уксусной кислоты(см. 6.2.5), 1,5 см3 метанола и сушат в вакууме
водоструйного насоса в течение 10 мин. Элюируют определяемые вещества 8 см3 элюирующего
раствора (см. 6.2.14) в новую виалу. Упаривают элюат досуха на системе упаривания растворителей
при температуре не более 40 °С. Остаток перерастворяют в 1 см3 подвижной фазы А (см. 6.2.1.1).
помещают в ультразвуковую баню при комнатной температуре на 1 мин, затем фильтруют через
мембранный фильтр в виалу вместимостью 2 см3и используют для ВЭЖХ-МС/МС анализа.
8 Порядок выполнения анализа
8.1 Условия хроматографических измерений
8.1.1 Хромато-масс-спектрометр включают в соответствии с руководством (инструкцией) по
эксплуатации и устанавливают параметры, рекомендуемые изготовителем хроматографических
колонок. Например, для колонки диаметром 2 мм. длиной 150 мм. с обращенно-фазным сорбентом С18
с размером частиц 5.0 мкм. применяют следующие хроматографические условия:
- температура колонки — 40 °С
- скорость потока подвижной фазы — 0.2 см3/мин
- объем вводимой пробы — 50 мм3.
8.1.2 Разделение проводят в режиме градиентного элюирования (приготовление растворов
элюентов по 6.2.1) в соответствии с таблицей 5.
Т а б л и ц а 5 — Условия хроматографического разделения
Время, мин
0.0
35.0
35.1
45.0
Подвижная Фаза А.
%
95
10
95
95
Подвижная фаза Б.%
5
90
5
5
8.1.3Параметры воздействия на ионы в режиме мониторинга нескольких реакций (MRM)
приведены в таблице 6.
Таблицаб — Параметры воздействия на ионы врежиме MRM иусловияхэлвктрораслылвния с регистрацией
положительных ионов
(<-адреностимулятор
Ион-
предшественник.
m!z
Ион-продукт.
т<г
Потенциал
декласте
ризации. В
Энергия
соударений,
эВ
Ускоряющее
напряжение на выходе
из ячейки
столкновений.
В
Циматерол-07 *
Циматерол-07’
Циматерол
Циматерол
Тербуталин
Тербуталин
Сальбутамол-06*
Сальбутамол-06*
Сальбутамол
Сальбутамол
Зилпатерол
Зилпатерол
Зилпатерол -D7*
Зилпатерол -D7*
Цимбутерол-09*
Цимбутерол -D9*
227.4
227.4
220.3
220.3
226.3
226.3
246.3
246.3
240.4
240.4
262.1
262.1
269,2
269.2
243.4
243.4
209.4
161.3
202.3
160.2
152.3
125.3
228.4
148.3
222.3
148.3
244.3
185.1
251.2
185.2
225.4
161.4
40
40
38
38
53
53
58
58
49
49
60
60
60
60
49
49
15.7
25.3
13.9
23.2
22.6
33.4
16
26.7
15.4
26.3
19.2
33
20
39
14.7
21.3
12.6
8.9
11.9
9.0
8.0
6.2
14.0
8.0
13.3
8.0
15.3
10.6
17.0
25.0
14.0
9.0
13