ГОСТ 33780—2016
Си>м— измеренное значение массовой концентрацииафлатоксина В, в концентрате пробы с добав
кой. нг/см3;
V2— объем аликвоты фильтрата пробы, отобраннойдля проведения очистки по 9.3. см3 (10 см3);
СС1— массовая концентрация раствора афлатоксина Вг взятогодля внесениядобавки, нг/см3;
Vct — объем раствора афлатоксина В,, взятого для внесения добавки, см3(по 9.1—0.5 см3, по
9.2—0.25 см3).
Коэффициент извлечения афлатоксина В, определяют не менее двух раз на стадии освоения
методики изатем при смене партий реактивов. Полученные значениядолжны соответствовать следую
щим требованиям:
- каждое из полученныхзначений находится в интервалеот0.5до 1.0;
- относительное значение размаха полученных значений соответствует условию
I4mm Птп! £ Q -jQ(7)
•Г
гдвЦп**— наибольшее инаименьшее из полученных значений коэффициента извлечения афла
токсина В,;
rf— среднеарифметическое полученныхзначений коэффициента извлечения афлатокси
на В,.
Если оба этих условия выполняются, то среднеарифметическое значений коэффициента извле
чения афлатоксина В, (п) используют при расчете результатов испытаний по формуле (9). В противном
случае находят причины потерьафлатоксина В, и повторяют определение коэффициента извлечения.
П р и м е ч а н и я
1 Коэффициент извлечения афлатоксина В, зависит от матрицы пробы.
2 В случае низкогокоэффициента извлечения (менее 0.5)рекомендуется провести операции, изложенные в
настоящем пункте,бездобавления пробы продукции. Коэффициент извлечения афлатоксина В, в этомслучаедол
женсоставлять от0.8до 1.0. При более низких значенияхнаходят иустраняют причины недопустимых потерь афла
токсина В,,наиболее вероятной причиной которыхможетбыть неудовлетворительное качество карбоната натрия.
9 Проведение испытаний
9.1 Экстракция афлатоксина Вчиз проб зерна и продуктов его переработки, кормов и сырья
для их производства, а также орехов, чая, шоколада, какао
В коническую или плоскодонную колбу вместимостью 100 см3 помещаютот 4.5до 5.5 гизмельчен
ной пробы, 1гхлористогонатрия и25см3(V,. см3) смесиацетонитрил — вода по8.2.2. После перемеши
вания в течение 30 мин полученную смесь оставляют на 1—2 мин в покое, затем пропускают через
бумажный фильтр«краснаялента» иотбирают 10см3(V2,см3)фильтрата. Подготовленную аликвотную
порцию экстракта пробы очищают по 9.3.
9.2 Экстракция афлатоксина В, из проб масложировой продукции
В коническую колбу вместимостью 100 см3помещают от2.2 до 2.8 г пробы, добавляют 5 см3 гекса
на. 1 см3растворахлорида натрия массовойконцентрации40 г/дм3и20см3ацетонитрила (общий объем
водно-ацетонитрильного раствора V,. см3, равен 21 см3). Перемешивают 30 мин. Смесь переносят в
делительнуюворонкувместимостью 50—100 см3,добавляют5 см3гексанаи проводятэкстракциюжиров
в течение 1 мин. Нижний водно-ацетонитрильный слой пропускают через бумажный фильтр «красная
лента» и отбирают 10 см3(V2. см3) фильтрата. Подготовленную аликвотную порцию экстракта
пробы очищают по9.3.
9.3 Очистка фильтрата
Аликвоту фильтрата пробы (см. 9.1 и 9.2) пропускают через колонку с оксидом алюминия, подго
товленную по 8.9. и собирают в остродонную колбу вместимостью 25 см3. Промывают колонку 5 см3
ацетонитрила, собирая его в ту же колбу. Содержимое колбы упаривают в вакуумедосуха.
9.4 Подготовка концентрата пробы
К сухому остатку, полученному по 9.3, добавляют 50 мм3ТФУ. тщательно омывают дно колбы,
закрываютстекляннойпришлифованнойпробкойивыдерживают10 мин. ОстатокТФУ отгоняют ввакуу
медосухадоисчезновенияеехарактерногозапаха, сухойостатокрастворяют в 1см3(V3,см3) подвижной
фазы, перемешивают, закрывают стеклянной пришлифованной пробкой и выдерживают не менее 10
мин. Допускается растворять сухой остаток в ином объеме подвижной фазы (от 0.4 до 5.0 см3) в
зависимости от ожидаемой концентрации афлатоксина В,.
8