ГОСТ 33442—2015
Приложение D
(рекомендуемое)
Применение активного ила из окружающей среды
с низкой концентрацией биомассы — анаэробный осадок, донные отложения
D.1 В общем случае видовая микробная активность (объем продуцированного газа на 1 г сухого вещества)
встречающихся в природе анаэробных осадков, отложений, грунтов и т. п. значительно ниже, чем этот показа
тель для анаэробного ила, полученного из сточных вод. В результате этого ингибирующие эффекты химических
веществ в данных, менее активных пробах следует измерять в измененных условиях испытания. Для данных,
менее активных проб возможно два общих алгоритма:
a) проведение модифицированного предварительного испытания (8.11) с неразведенной пробой ила,
грунта и т. д. при (35±2) °С или при температуре места отбора проб для более точной имитации (как описано в
[31):
b
) проведение испытания с разведенным 1 : 100 метантенковым илом для имитации ожидаемой низкой ак
тивности пробы из окружающей среды, но при поддержании температуры на уровне (35±2) °С (как описано в (4)).
D.2 Возможный вариант (а). Следует проводить испытание в соответствии с представленной в стандарте
процедурой (аналогично как описано [3]). Особенно важно провести предварительное испытание (8.11) для уста
новления оптимальных условий, если они еще не известны из предшествующего испытания. Пробу ила или
осадка следует тщательно перемешать, например в смесителе, при необходимости, развести небольшим коли
чеством бескислородной воды для разведения (8.3) таким образом, чтобы проба была достаточно разбавленной
для переноса пипеткой с широким носиком или с помощью мерного цилиндра. Если предполагается, что пита
тельные вещества могут отсутствовать, то пробу ила следует отцентрифугировать (в анаэробных условиях) и
повторно суспендировать в минеральной среде, содержащей дрожжевой экстракт (D.11).
D.3 Возможный вариант (Ь). Вариант (Ь) предполагает имитацию низкой активности проб из окружающей
среды, но при отсутствии высокого содержания взвешенных твердых частиц, присутствующих в данных пробах.
Влияние таких твердых частиц на ингибирование неизвестно, но. возможно, что взаимодействие тестируемых
химических веществ и составляющих компонентов ила. а также адсорбция тестируемых химических веществ на
твердых частицах могут привести кснижению токсичности тестируемого химического вещества.
0.4 Температура
Для строгой имитации испытание проводят при температуре места отбора пробы, поскольку известно, что
различные группы метанобразующего консорциума бактерий функционируют в разных температурных диапазо
нах. а именно термофилы (=30-35 °С). мезофиллы (20-25 С) и психрофилы (< 20 “С), и демонстрируют различ ные
модели ингибирования.
0.5 Продолжительность
В общем испытании с использованием неразведенного ила (а), обычно достаточно 2-4 сут для образова
ния газа. В испытании с разведенным илом (Ь) заданный период времени образуется недостаточное количество
газа, если он вообще образуется (по результатам межлабораторного теста). Считается, что для проведения ис
пытания (Ь) требуется не менее 7сут.
Испытание с низкой концентрацией биомассы (Ь):
В процедуру испытания, представленную в настоящем стандарте, должны быть внесены следующие из
менения идополнения.
0.6 Добавить в раздел 3 «Принцип метода»:
«Данный метод проводят с разведенным 1 : 100 анаэробным илом, частично для имитации низкой актив
ности осадков и отложений. Температура инкубации составляет 35 "С или соответствует температуре места от
бора проб. Поскольку бактериальная активность в данном случав значительно ниже, чем для
неразведенного ила. то период инкубации следует увеличить по меньшей мере до 7 сут».
D.7 Добавить в (8.1 а):
«Термостат должен обеспечивать возможность работы при температуре до 15 С».
D.8 Добавитьдополнительный реактив после 8.2:
«Фосфорная кислота
Н3РО4,
85 мас.% в воде».
D.9 Добавить в конце 8.5:
«В испытании используют конечную концентрацию общего сухого вещества на уровне (0.20±0,05) гУл».
0.10 Подраздел 8.6 «Тестовый субстрат»:
«Данный субстрат не используют и заменяют дрожжевым экстрактом» (8.6: 0.11. D.12. D.13).
0.11 Требуется минеральная среда, содержащая микроэлементы, для разведения анаэробного ила. Для
удобства органический субстрат, дрожжевой экстракт добавляется к этой среде.
Добавить после 8.6:
«а) Минеральная среда для испытаний с дрожжевым экстрактом.
13