ГОСТ 33422—2015
9.2 Параметры настройки масс-спектрометрического детектора
Для анализа подобраны следующие параметры масс-спектрометрического детектирования:
Температура источника — 100 °С;
Температура газа десольвации — 320 °С;
Скорость потока газа десольвации — 8 дм3/мин;
Давление иглы распылителя — 2.07 Бар (30 psi).
Условия регистрации аналитических сигналов в режиме мониторинга множественных реакций
(MRM) представлены в таблице 2.
Т а б л и ц а2 — Параметры воздействия наионы в режиме MRM и условия ионизации
>аспылением в электрическом поле (ESQ с регистрацией положительных ионов
Дочерние
Напряжение на
Анаши
Ион предшественник,
m il
фрагменторе
Энертия диссоциации (С£). В
ионы.
т !г
{fra g ).
В
364.0
364.0
134.9
261.9
112
112
30
13
489.9
387,8
116
17
3-йод гирозин
(М И Т )
3.5-
дийодтирозин
(ДИ Т)
489.9
260.9
116
30
Условия детектирования оптимизируют в ручном режиме. Для этого используют градуировочные
растворы индивидуальных йодтирозинов (МИТ или ДИТ) концентрации100. 10 и 1 нг/см3,
приготовленные по 8.1.
При этом, соотношение сигнал/шум (S/W) молекулярного иона должно быть не менее 1:10.
Напряжение на фрагменторе оптимизируют с шагом 10 Vпо максимальному отклику
протонированного молекулярного иона. Энергию диссоциации (СЕ) оптимизируют с шагом 5 У по
максимальному отклику характерного дочернего иона.
9.3 Градуировка ВЭЖХ-МС/МС системы
Приготовленные по 8.1 градуировочные растворы подвергают ВЭЖХ-МС/МС анализу в
условиях, выбранных в соответствии с 9.1—9.2. Проводят по три параллельных измерения для
каждой концентрации градуировочных растворов.Полученные хроматограммы обрабатывают с
использованием компьютерной системы обработки данных хроматографа. Определяют абсолютное
время удерживания йодтироэина (МИТ или ДИТ). С использованием средств программного
обеспечения строят градуировочную зависимость площади пика определяемого йодтирозина (МИТ
или ДИТ) от концентрации йодтирозина (МИТ или ДИТ) в пробе.
Коэффициент линейной корреляции полученной градуировочной зависимости должен быть не
менее0.99.Приневыполненииэтогоусловиявыясняютпричины,приводящиек
неудовлетворительным результатам, и устраняют их. В случае необходимости готовят новые
градуировочные растворы.
Хроматограммаикалибровочныекривыеградуировочныхрастворовйодтирозинов
представлены в приложении А.
Проведение градуировки обязательно при замене хроматографической колонки, а также при
систематическом получении неудовлетворительных результатов контроля, выполняемого по 12.
9.4 Контроль аналитической системы
Контроль выполняют с использованием приготовленных по 8.1 градуировочных растворов.
Полученный результат анализа не должен отличаться от действительного значения концентрации
определяемых йодтирозинов (МИТ и ДИТ) в градуировочном растворе более чем на 3 %,
относительное стандартное отклонение времени удерживания аналитов не более чем на 5 %. В
случае невыполнения указанного критерия стабильности градуировочной характеристики, проводят
новую градуировку.
Контроль аналитической системы осуществляется при условиях, указанных в 9.1—9.2.перед
началом проведения измерений, а также при смене хроматографической колонки, чистке блоков
аналитического прибора и т.д.
9.5 Выполнение измерений
Для контроля фона прибора, перед началом серии измерений, между анализами проб в
хроматограф вводят 10 мкл подвижной фазы (А — 20 %. В — 80 %).
В виалы вносят подготовленную пробу по 8.3 и анализируют на системе ВЭЖХ-МС/МС при
условиях, указанных в9.1—9.2.
6