ГОСТ 33262—2015
6.6.2 Обработка результатов
Общую концентрацию микроконидий в разведенной вакцине X. млн/см3, рассчитывают по фор
муле
0Д
Х = —
2
Ю3 5.
(
1
)
где X — среднеарифметическое число микроконидийпо двум сеткам камеры Горяева. шт.;
0.02 — объем заполнения камеры Горяева, мм3;
103 — пересчетобъема вакцины на 1см3:
5 — постоянный коэффициент, учитывающий степень разведения вакцины.
За окончательный результат принимаютсреднеарифметическое значение потрем флаконам.
6.7 Определение концентрации жизнеспособных микроконидий
6.7.1 Проведение испытаний
Концентрацию жизнеспособных микроконидий определяютв трехфлаконах свакциной, подготов
ленной по 6.6.1.
Испытания проводят через 30—60 мин после ресуспензирования. На каждый флакон берут пять
пробирок, в каждую из которыхбюреткой или пипеткой вносят по4,5 см3разбавителя. Содержимоефла
кона с ресуспензированной вакциной тщательно перемешивают встряхиванием, затем новой пипеткой
отбирают0.5см3ресуспензированнойвакцины, переносятв первую пробиркуи перемешивают, затемиз
первой пробирки берут0.5 см3полученной взвеси ипереносят вовторую пробиркуи т. д.. тоесть готовят
ряд последовательных разведений от 10-1до 10-5. Из пятой пробирки пипеткой отбирают 1.0 см3 взвеси и
засевают в две чашки Петри по 0.5 см3в каждую. Посев из каждого флакона делают в трех повтор
ностях. тоестьлошестьчашекПетри накаждыйфлакон.
Л
егким покачиваниемчашекзасеянную вакцину
распределяют равномерно по поверхности питательной среды. Засеянные чашки помещают в термо
стат при температуре (26
±
1)*С. Число выросшихколоний подсчитывают на 7—12 сут.
6.7.2 Обработка результатов
Концентрацию жизнеспособных микроконидий в разведенной вакцине У, млн/см3, рассчитывают
по формуле
у = Х ^ ..ю ° .5 .
6 0,5
(2)
’ ’
где У п— число колоний, выросшихв шести чашках, шт.;
6 — число засеянныхчашек;
0.5 — объем засеваемой суспензии, см3:
105 — степень разведения вакцины;
5 — пересчет на одну иммунизирующую дозу, равную 1см3.
За окончательный результатпринимаютсреднеарифметическое значение потрем флаконам.
К концу срока годности допускается снижение концентрации жизнеспособных микроконидий до
10 млн/см3, что соответствует минимальной иммунизирующейдозе вакцины.
6.8 Определение безвредности
6.8.1 Общие принципы испытания безвредности — по ГОСТ 31926.
6.8.2 Подготовка к испытанию
Для проведения испытания вакцину разводятдо рабочегоразведения из расчетаоднадоза вакци
ны в 1 см3разбавителя. Готовят объединенную пробу вакцины из трех флаконов, отбирая из каждого
равные объемы вакцины.
6.8.3 Проведение испытания
Вакцину из объединенной пробы вводятподкожнов областьспины 10белым мышам вдозе 0.1 см3
или шести морским свинкам внутримышечно с наружной стороны бедра вдозе 0,5 см3,или трем кроли
кам внутримышечно с наружной стороны бедра в дозе 1.0 см3. Наблюдают за животными в течение
10 суток.
6.8.4 Обработка результатов
Вакцину считают безвредной, если все животные остаются живыми и клинически здоровыми в
течениесрока наблюдения.
7