ГОСТ 33277-2015
- скорость потока: 1.0 смэ/мим.
Проверку эффективности хроматографического разделения каротиноидов в данных условиях
осуществляют путем измерения раствора с массовой концентрацией каротиноидов 5 мг/дм3 (см.
таблицу 2. раствор No 3). В случае ручного ввода пробы петлю инжектора полностью заполняют
подготовленным раствором № 3. Эффективность хроматографического разделения признают
удовлетворительной, если коэффициент разделения пиков лютеина и бета-каротина составляет не
менее 1.3. а число эффективных теоретических тарелок, вычисленное по пику бета-каротина
составляет не менее 4000. Если данное условие не соблюдается, то для достижения требуемой
эффективности проводят замену хроматографической колонки на аналогичную новую. Контроль
эффективности хроматографического разделения проводят не реже одного раза в две недели.
В зависимости от типа применяемого хроматографа и хроматографической колонки допускается
изменение условий измерений, обеспечивающих требуемое разделение компонентов пробы в
порядке, указанном в настоящем разделе.
8.2 Градуировка хроматографа
Для установления градуировочной характеристики в инжектор хроматографа дозируют рабочие
градуировочные растворы, приготовленные в соответствии с таблицей 2. и регистрируют их
хроматограммы в условиях, приведенных в 8.1.
Для каждого градуировочного раствора выполняют два параллельных измерения в условиях
повторяемости. Компоненты идентифицируют по абсолютным значениям времени удерживания.
Вычисляют с помощью компьютерной программы обработки данных или вручную методом
наименьшихквадратовградуировочныекоэффициентыиустанавливаютградуировочную
характеристику для площади пика каждого каротиноида в градуировочном растворе
S,=kC,+b,
(1)
гдеs — площадь пика каротиноида (среднеарифметическое значение из результатов двух
измерений) при измерении /-го градуировочного раствора, AU c;
С. — массовая концентрация каротиноида в ьом градуировочном растворе, мг/дм3;
Ь.
к
— градуировочные коэффициенты в уравнении прямой, вычисленные методом наименьших
квадратов.
Градуировочную характеристику, вычисленную методом наименьших квадратов, считают
приемлемой, если значение квадрата коэффициента корреляции Я2 для каждого каротиноида
составляет не менее 0.990.
Градуировочную характеристику строят заново в случав замены оборудования, колонок, партий
реактивов или при выявлении несоответствия метрологическим требованиям результатов контроля
стабильности, но не реже одного раза в месяц.
8.3 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Проверку градуировочной зависимости проводят перед каждой новой серией измерений.
Допускается проводить контроль только по одному из каротиноидов, чередуя их.
Измеряют два градуировочных раствора, приготовленных по 7.3.2. с массовой концентрацией
каротиноидов близкой к началу и концу диапазона измерений в тех же условиях, в которых была
установлена градуировочная характеристика.
Регистрируют хроматограммы каждого градуировочного раствора в тех же условиях, в которых
была установлена градуировочная характеристика.
Измеренное таким образом значение массовой концентрации каротиноидов сравнивают с
реальным содержанием каротиноидов в градуировочных растворах по условию (2).
Градуировочнуюхарактеристикусчитаютстабильнойвслучае,еслидлякаждого
градуировочного раствора выполняется условие
•100£Krftl.
(
2
)
где Си».)— массовая концентрация каротинода в Атом градуировочном растворе, измеренная по
градуировочной характеристики, мг/дм3;
Сф/— массовая концентрация каротинода в /-том градуировочном растворе, мг/дм3;
К,о. I— норматив контроля. Kv(=0,5-Sioiti,
где 8;л,и— границы относительной погрешности для (5-каротина, лютеина или ликопина
(см. таблицу 3), %;
/ — номер градуировочного раствора (см. таблицу 2).
6