ГОСТ 33277—2015
тетрагидрофурана. перемешивают. Полученный раствор дегазируют под вакуумом в течение 15 мин с
одновременной фильтрацией через фильтр с диаметром пор 0.45 мкм. Допускается приготовление
меньшего объема подвижной фазы, исходя из потребности в ней.
Раствор хранят в стеклянной бутылке с плотно закрытой крышкой в течение двух рабочих дней.
Перед использованием подвижную фазу дегазируют в круглодонной колбе под вакуумом на
ультразвуковой бане или другим способом.
7.3 Приготовление градуировочных растворов
7.3.1 Приготовление основного градуировочного раствора А каротиноидов с массовой
концентрацией p-каротина, лютеина и ликопина по 50,4 мг/дм3
Взвешивают по (0.0053
±
0.0002) г p-каротина, лютеина и (0.0056
±
0.0002) г ликопина в стакане
вместимостью 100 см3, растворяют в 30 см3 ТГФ (см. раздел 4). затем переносят в мерную колбу
вместимостью 100 см3, доводят объем раствора до метки ТГФ и перемешивают.
7.3.2 Приготовление рабочих градуировочных растворов
Из основного раствора готовят не менее пяти рабочих градуировочных растворов каротиноидов
путем точного разбавлениея (разведения) в соответствии с таблицей 2. Аликвоты основного раствора
дозируют с использованием пипеток 1-1-2-1,1-1-2-5.1-1-2-10,1-1-2-25 по ГОСТ 29227.
Приготовленные рабочие растворы рекомендуется профильтровать через мембранный фильтр.
Таблица 2 — Приготовление градуировочных растворов
N*градуиро
вочною
раствора
(/« 1-6»
Компоненты
Объем
мерной
колбы,см1
Способ приготовления
Массовая
концентрацияв
полученном
растворе Сч„ мг^дм’
1
Р-каротин
50
В мерную колбу приливают 20.0 см*
раствора А. приготовленного по 7.3.1.
доводят до метки тетрагидрофураном
и перемешивают
20.2
Л
ютеин
20,2
Л
икопин
20.2
2
Р-каротин
50
В мерную колбу приливают 10.0 см*
раствора А. приготовленного по 7.3.1.
доводят до метки тетрагидрофураном
и перемешивают
Л
ютеин
Л
икопин
10,1
10.1
10.1
3
р-каротин
50
В мерную колбу приливают 5.0 см5
раствора А. приготовленного по 7.3.1.
доводят до метки тетрагидрофураном
и перемешивают
5.0
Л
ютеин
5.0
Л
икопин
5.0
4
р-каротин
50
В мерную колбу приливают 2.5 см*
раствора А. приготовленного по 7.3.1.
доводят до метки тетрагидрофураном
и перемешивают
2.5
Л
ютеин
2.5
Л
икопин
2.5
5
р-каротин
50
В мерную колбу приливают 1.0 см*
раствора А. приготовленного по 7.3.1.
доводят до метки тетрагидрофураном
и перемешивают
1.0
Л
ютеин
1.0
Л
икопин
1.0
Градуировочные растворы готовят непосредственно перед градуировкой хроматографа.
8 Проведение измерений
8.1 Условия хроматографических измерений
Измерения проводят при следующих условиях:
- температура термостата колонки: (20
±
5) °С (при отсутствии термостата допускается
проведение измерений при температуре окружающего воздуха, приведенной в разделе 6);
- рабочая длина волны светопоглощения: 450 нм (для спектрофотометра) или диапазон волн
светопоглощения 190—600 нм (для фотодиодной матрицы);
- объем вводимой пробы: 5—20 мм3;
- режим элюирования: изократический;
5