ГОСТ ISO 8607—2015
a) Если исходная суспензия содержит обычное количество антибиотиков [т. е. 103международ
ных единиц (ME)1* пенициллина и 1 мг стрептомицина или другого антибиотика широкого спектра
действия в процентах], то используют конечное разбавление 10~5.
b
) Есликоличествоантибиотиковотличаетсяотуказанногов пункте а), то используюттакоеконеч
ное разбавление, при котором в суспензии содержится пенициллина не более 0,1 МЕ/см3, а антибиоти
ков широкогоспектрадействия — не более 0.1 мкг/см3.
П р и м е ч а н и е — Высокая концентрация антибиотиков может ингибировать рост микроорганизмов и
можно получить искаженные результаты.
9.2 Инокуляция и инкубация
9.2.1 Берут две стерильные чашки Петри (6.4). В каждую чашку стерильной пипеткой (6.5) вносят
по 1см3 конечного разведения исходной суспензии (см. 9.1).
В дведругие стерильныечашки Петри новой стерильной пипеткой вносят в каждую чашку по 1см3
суспензии с разведением на порядок меньше, чем последнее.
9.2.2 В каждую чашку Петри заливают около 15 см3 агаровой среды (5.2) с температурой
(45
±
1) °С. Промежуток от окончания подготовки исходной суспензии до разлива среды по чашкам не
должен превышать 15 мин.
Тщательно перемешивают инокулят со средой и дают смеси затвердеть, оставив чашки на гори
зонтальной поверхности в прохладном месте.
9.2.3 Подготовленные чашки переворачивают и ставят в инкубатор (6.2)с температурой 37 °С на
(72 «3)ч.
9.3 Контрольные чашки
Инокулируют и инкубируют две контрольные чашки параллельно с операциями, определенными
9.2. используя 1см3разбавителя (5.1) конечного разбавления (см. 9.1).
9.4 Представление результатов
9.4.1 Исследование контрольных чашек
Вовсехслучаяхосуществляют первоначальныйосмотрконтрольныхчашек(9.3) для определения
присутствия колоний в пределах среды. Если колонии присутствуют, то контрольные чашки и чашки,
содержащие испытуемые пробы, бракуют, и процедуруповторяют.
Если колонииотсутствуют, то проводятоценкучашек, содержащих испытуемые пробы по9.4.2.
9.4.2 Подсчет колоний
Подсчет колоний в каждой из чашек, содержащей испытуемую пробу, проводят с помощью обору
дования (6.10) или визуально.
Считают только хорошо различимые колонии, которые выросли в среде и на поверхности среды.
Чашки, в которыхболее половины поверхности зарастает, не учитывают.
10 Выражение результатов
П р и м е ч а н и е — Этот раздел основан на ISO 4833.1991 (см. (3J).
10.1 Метод расчета
10.1.1 Общий подход
Если количество колоний начашкахс конечным разбавлением больше, чем начашкахс предвари
тельным разбавлением, то берут в расчет количество колоний, полученных на чашках с конечным раз
бавлением.
10.1.2 Чашки содержащие от 15до 300 колоний
Отбирают чашки от двух последующих разбавлений, содержащие не более 300 колоний. Важно,
чтобы одна из этихчашек содержала, по меньшей мере. 15 колоний.
ВычисляютNколичествоколониеобразующихединиц (КОЕ) на кубический сантиметриспытуемой
пробы, используя следующее уравнение
(n, + o.Yi2y /’
" ME — точно установленное значение международного стандартного образца. Для группы пенициллина
имеется несколько стандартных образцов. Например, 1 ыг калиевой соли бензил пенициллина соответствует
1670 ME.
4