ГОСТ ISO 8607—2015
5.2.2 Приготовление
Растворяют компоненты или дегидратированную готовую среду в воде, при необходимости подо
гревают.
При необходимости, устанавливают значение pH так. чтобы после стерилизации оно было равно
7.0
±
0.2 при температуре 25 °С.
Распределяют среду по пробиркам или колбам (6.3) в количествах, необходимых для заполнения
1/2 их объема.
Стерилизуютвавтоклаве(6.1)притемлературе(121
±
1) "Свтечение 15мин.
Если среду будут использовать сразу, то ее охлаждают до температуры 44 °С—47 СС на водяной
бане (6.8), а затем добавляют 10 % (по объему) ииокулированной и стерилизованной1) бычьей или
овечьей сыворотки.
6 Оборудование
П р и м е ч а н и е — Имеющееся оборудование должно быть приемлемой альтернативой используемой
стеклянной посуде и иметь подходящие характеристики.
Используют обычноедля микробиологических лабораторий оборудование, в том числе:
6.1 Стерилизатор(длясухой стерилизации)илиавтоклав (длястерилизации паром),см. ISO 7218.
6.2 Инкубатор, способный поддерживатьтемпературу (37 ♦1) °С.
6.3 Пробиркидиаметром 16 мм и длиной 160 см или флаконы вместимостью не более 500см3.
6.4 Чашки Петри изстекла или пластика диаметром 90—100 мм.
6.5 Пипетки градуированные вместимостью 1см3с ценой деления 0.1 см3.
Нельзя использоватьвыдувные пипетки.
Вместе с тем, можно использовать микропипетки вместимостью (1.0
±
0.01)см3.
6.6 pH-метр электрическийс точностью измерения 0,1 ед. pH при температуре 25 ®С.
6.7 Водяная баня, способная поддерживать температуру (37 i 1) “С.
6.8 Водяная баня, способная поддерживатьтемпературу (45
±
1) °С.
6.9 Водяная баня, позволяющая поддерживатьтемпературу кипения.
6.10 Оборудованиедля подсчетаколоний, состоящееизосвещенной базыстемнымфоном суве
личительными линзами, подходящее для использования при увеличении х1,5. оснащенное механичес
ким или электронным цифровым счетчиком.
7 Отбор проб
Отбирают изсериидоз необходимоеколичестводоз спермы глубокой заморозки в упаковке любо
го типа (гранулы или соломинки по0,25 см3 или 0.5 см3) так. чтобы объем выборки составлял 1.0 см3.
Отобранные испытуемые пробы хранят в жидком азоте.
Для исследования испытуемые пробы переносят из большого сосуда с жидким азотом в неболь
шой лабораторный контейнер с жидким азотом.
8 Подготовка испытуемой пробы
Испытуемую пробу размораживают, поместив ее в водяную баню (6.7) с температурой 37 еС на
3 мин.
Размороженная испытуемая проба может храниться в холодильнике при температуре 4 °С, но не
более 1ч.
9 Методика
9.1 Порция испытуемой пробы, исходная суспензия и разведение
Готовят в стерильном боксе исходную суспензию в соответствии с ISO6887-1.
Числодальнейших разведенийвыполняютв зависимостиотсодержанияантибиотиков в исходной
суспензии как указано ниже.
1’ Путем ультрафипьтрации (фильтр 0.2 нм).
3