ГОСТ 32296—2013
перед введением дозы, но поить; мышей не кормить три-четыре часа перед введением дозы, но
поить). После голодания необходимо взвесить животных, затем ввести испытываемое вещество.
После введения препарата крыс не кормить три - четыре часа, мышей - один - два часа. Если доза
вводится порционно, в зависимости от периода введения дозы животным может потребоваться корм
или питье.
4.3 Предварительное исследование
Целью предварительного исследования является подбор подходящей начальной дозы для
основного исследования. Изучаемый препарат вводится одному животному последовательно в
соответствии с приложением А. Предварительное исследование завершается, когда может быть
принято решение относительно начальной дозы для основного испытания (или если при
минимальной установленной дозе отмечается смерть).
Начальная доза для предварительного исследования подбирается из установленных уровней
доз (5. 50, 300 и 2000 мгЛсг) как доза, которая может оказаться токсичной на основе исследований
данного препарата или структурно родственных веществ в опытах in vivo или in vitro. При отсутствии
такой информации начальная доза составляет 300 мг/кг.
Между введением каждой дозы должно проходить, как минимум, 24 ч. Все животные должны
наблюдаться в течение, как минимум. 14 дней.
В исключительных случаях, и только когда это оправдано определенными условиями, может
быть рассмотрено исследование дополнительного установленного уровня дозы в 5000 мг/кг
(подраздел 4.6).
Из соображений гуманного отношения к животным, исследования, относящиеся к Классу 5 СГС
(от 2000 до 5000 мг/кг) нецелесообразны и могут проводиться, только если результаты подобных
исследований имеют значение для здоровья животных или человека.
В случаях, когда животное при самом низком установленном уровне дозы (5 мг/кг) в
предварительном исследовании умирает, необходимо закончить исследование и присвоить веществу
класс 1 согласно классификации СГС (приложение Б). Однако если требуется дальнейшее
подтверждение классификации вещества, необязательное дополнительное исследование может
быть проведено следующим образом; второе животное тестируется с использованием дозы 5 мг/кг.
Если второе животное умирает, то Класс 1 СГС подтверждается, и исследование немедленно
завершается. Если второе животное выживает, то проводится дополнительное исследование на трех
животных с использованием дозы 5 мг/кг. Поскольку в данном случае существует высокий риск
смертности, дозировку проводят последовательным способом из соображений бережного отношения к
животным. Временной интервал между дозированием каждого животного должен быть
достаточным, чтобы установить, что предыдущее животное, вероятно, выживет. Если происходит
вторая смерть, то последовательность дозирования должна быть немедленно завершена, и в
дальнейшем тестирование на животных не проводится. Поскольку возникновение второй смерти
(независимо от числа животных, протестированных ко времени завершения эксперимента) совпадает с
результатом А (два или более смертельных случая), следует придерживаться правила
классификации при установленной дозе 5 мг/кг (класс 1, если есть два или более смертельных случая или
класс 2 - не более одного смертельного исхода).
4.4 Основное исследование
Шаги, которые необходимо предпринять после исследования с начальным уровнем дозы,
показаны в Схеме 2. Необходимо проведение одного из трех действий;
-прекратить испытание и определить соответствующий класс опасности;
-провести испытание с более высоким уровнем дозы;
-провести испытание с меньшим фиксированным уровнем дозы.
Однако в целях защиты животных, уровень дозы, который явился причиной смерти животного в
предварительном исследовании, повторно в основном исследовании не рассматривается.
Исследования показали, что наиболее вероятным результатом испытания с начальным уровнем дозы
будет возможность классификации вещества и отсутствие необходимости проводить дальнейшие
исследования.
В общей сложности пять животных одного пола следует использовать при проведении
эксперимента с каждым уровнем доз. Из пяти животных в группе отбирается одно животное из
предварительного исследования с выбранным уровнем дозы и четыре дополнительных животных (за
исключением, нестандартных случаев, когда рассматриваемый уровень дозы в основном испытании не
был включен в предварительное исследование).
Временнойинтервалмеждуприемом дозкаждого уровняопределяетсяначалом,
продолжительностью и тяжестью токсических признаков. Исследование животных со следующей
дозой должно быть отложено до тех пор. пока не выживет одно из животных, принявших
предыдущую дозу. Между принятием доз каждого уровня рекомендуется делать перерыв в три или
3