ГОСТ 32379—2013
5.5 Схема исследования
Введение дозы животным обоих полов следует начинать, как минимум, за две недели до
спаривания, после прохождения ими пятидневной акклиматизации. Исследование должно быть
запланировано таким образом, чтобы спаривание начиналось сразу по достижению животными
половой зрелости. Этот период может слегка различаться для разных видов крыс. Например, крысы
вида Sprague Dawley - в возрасте 10 недель, крысы вида Wistar - 12 недель. Самки с потомством
должны умерщвляться на четвертый день после родов или вскоре после этого. День родов (т.е. когда
роды завершились) считается нулевым днем после родов. Самки, не демонстрирующие признаков
беременности, умерщвляются на 24-26 день после последнего дня периода спаривания. Введение
доз животным обоих полов продолжается весь период спаривания. Самцам продолжают введение
доз после периода спаривания, пока минимальный период дозировки не достигнет 28 дней. Затем их
умерщвляют или сохраняют и продолжают дозирование для возможного второго спаривания, если
необходимо.
Ежедневное введение доз беременным самкам следует продолжать всю беременность и как
минимум до третьего дня после родов включительно или за день до умерщвления. Для
исследований, где тестируемое вещество вводится ингаляционно или дермально, введение доз
продолжается, как минимум, до 19 дня беременности включительно.
График схемы исследования, показывающий максимальную длительность исследования,
основанную на полном четырнадцати дневном периоде спаривания, приведен в Приложении А.
5.6 Процедура спаривания
Обычно в таких исследованиях используется спаривание 1:1 (одна самка на одного самца).
Исключения могут быть сделаны при случайной смерти самцов. Самку следует помещать с одним и
тем же самцом до наступления беременности или в течение 2-х недель. Каждое утро самки должны
проверяться на наличие спермы или вагинальной пробки. Нулевым днем беременности считается
день обнаружения вагинальной пробки или спермы. В случае, если спаривание неуспешно, может
быть рассмотрено повторное спаривание с самцами, уже осуществившими успешное спаривание.
6 Наблюдения
В течение всего периода исследования общее клиническое наблюдение должно проводиться
как минимум раз в день и чаще, если обнаруживаются признаки токсичности. Их предпочтительно
проводить ежедневно в одно и то же время, принимая во внимание период максимума
предполагаемого воздействия дозы. Соответствующие изменения поведения, признаки трудных или
продолжительных родов и все другие проявления токсичности, включая летальный исход, следует
фиксировать. Такие записи должны включать время начала, степень и длительность признаков
токсичности.
Длительность беременности должна фиксироваться и отсчитываться от 0-го дня беременности.
Каждый приплод должен быть изучен как можно раньше после рождения для установления
количества и пола детенышей, мертворожденных, родившихся живыми, малорослых (детеныши,
которые заметно меньше, чем детеныши из контрольной группы) и наличия явных аномалий.
Живые детеныши должны быть подсчитаны, следует установить их пол. Приплод следует
взвешивать в течение 24 часов после родов (нулевой или первый день после родов) и на 4-й день
после родов. В дополнение к наблюдению за родительскими особями любое аномальное поведение
потомства должно быть зафиксировано.
6.1 Масса тела и потребление воды/пищи
Самцы и самки должны взвешиваться в первый день введения дозы, как минимум еженедельно
в дальнейшем и по окончании исследования. Во время беременности самок следует взвешивать в
нулевой, седьмой, четырнадцатый и двадцатый дни. в течение 24 часов после родов (нулевой или
первый день после родов) и на четвертый день после родов. Все наблюдения должны фиксироваться
отдельно по каждому взрослому животному.
В течение периодов перед спариванием, беременности и кормления, потребление пищи должно
измеряться как минимум еженедельно. Измерение потребления пищи в период спаривания
необязательно. Потребление воды в этот период следует измерять, если исследуемое вещество
вводится с питьевой водой.
6.2 Патология
После умерщвления или смерти во время исследования взрослые особи должны быть изучены
макроскопически на наличие аномальных или патологических изменений. Особое внимание должно
быть уделено органам репродуктивной системы. Количество мест имплантации должно быть
зафиксировано. Настоятельно рекомендуется подсчет желтых тел.
Яички и придатки яичек всех взрослых самцов должны быть взвешены.
4