ГОСТ 32644—2014
4.1.2 Условия содержания и кормления
Температура в комнатах подопытных животных должна быть 22°С (±3°С). Хотя относительная
влажность воздуха должна быть как минимум 30% и. желательно, не превышать 70% (если только не
проводится уборка помещения), оптимальная влажность - 50-60%. Свет должен быть искусственным с
последовательностью: 12 часов - свет. 12 часов - темнота. Для кормления могут использоваться
традиционные лабораторные диеты с неограниченным количеством питьевой воды. Животных
группировать по клеткам по дозам, но количество животных в клетке не должно мешать свободному
наблюдению за каждым животным.
4.1.3 Подготовка животных
Животныевыбираютсяслучайнымобразом,маркируютсяиндивидуальными
идентификаторами и содержатся в своих клетках как минимум в течение 5 дней до начала
дозирования, чтобы дать им возможность адаптироваться в лабораторных условиях.
4.2 Подготовка доз вещества
Как правило, исследуемое вещество должно вводиться в постоянном объеме в диапазоне доз,
чтобы исследовать изменение концентрации дозируемого препарата. Когда, однако, исследуется
жидкость как конечный продукт или смесь, для последующей оценки опасности этого вещества более
актуальным может быть использование неразбавленного исследуемого вещества, т.е. в постоянной
концентрации, и это является требованием некоторых регулирующих органов. В любом случае,
объем максимальной дозы для введения превышать не следует. Максимальный объем жидкости,
который может быть введен за один раз, зависит от размера подопытного животного. У грызунов
объем в норме не должен превышать 1мл/100г массы тела; однако, в случае с водными растворами
можно рассматривать и 2мл/100г. Что касается технологии приготовления дозируемого препарата,
рекомендуется, если возможно, использование водных растворов/суспензий/эмульсий; далее, по
предпочтительности, следуют растворы/суслензии/эмульсии в масле (например, кукурузное) и затем
возможны растворы в других средах. Для сред, отличных от воды, должны быть известны их
токсикологические свойства. Дозы должны готовиться непосредственно перед введением, за
исключением случаев, когда известна стабильность препарата в течение периода, когда он будет
использован, и доказана его приемлемость.
4.3 Процедура проведения испытания
4.3.1 Количество и пол животных
На каждом этапе используют трех животных. Уровень дозы, используемой как начальная доза,
выбирается из одного из четырех фиксированных уровней: 5. 50. 300 и 2000мг/кг массы тела. Уровень
начальной дозы должен быть таким, чтобы с наибольшей вероятностью вызвать смерть некоторых из
дозируемых животных. Блок-схема Приложения 1 описывает процедуру, которой необходимо
следовать для каждой из начальных доз.
Когда имеющаяся информация показывает, что на самом высоком уровне начальной дозы
(2000мг/кг массы тела) смертельный исход маловероятен, проводится испытание предельной дозы.
Когда информация по тестируемому веществу отсутствует, из соображений благополучия животных
рекомендуется использовать начальную дозу 300мг/кг массы тела.
Временной интервал между экспериментальными группами определяется наступлением,
продолжительностью и тяжестью признаков токсичности. Введение вещества животным в следующей
дозе необходимо отложить до того момента, когда появится уверенность в выживании дозированной
ранее группы.
В исключительных случаях и только тогда, когда это оправдано конкретными нормативными
требованиями,можно рассматривать использование дополнительного верхнего уровня дозы в
5000мг/кг массы тела (см. Приложение В). В виду интересов благополучия животных их тестирование в
диапазонах класса 5 (2000-5000мг/кг) СГС не рекомендуется и должно рассматриваться только тогда,
когда имеется большая вероятность, что результаты такого исследования имеют прямое
отношение к защите здоровья человека или животных, или окружающей среды.
4.3.2 Введение доз вещества
Исследуемое вещество вводится одной дозой через зонд с помощью желудочного зонда или
подходящей полой трубки для зондирования. В чрезвычайных обстоятельствах, когда введение
одной дозой невозможно, доза может вводиться небольшими порциямив течение периода, не
превышающего 24 часа.
До введения дозы животные должны оставаться голодными (например, в случае с крысами,
пища (но не вода) должна отсутствовать всю ночь, в случае с мышами пища (но не вода) должна
отсутствовать 3-4 часа). За периодом голодания следует взвешивание животных и введение
им
3